細胞内シグナル伝達による自己応答性の制御

通过细胞内信号转导控制自我反应

• 批准号: 20060017
• 负责人: 小林 隆志
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20060017/
• 关键词: サイトカイン; シグナル伝達; 炎症; 免疫抑制; 自己応答; T細胞; マクロファージ; 樹状細胞; サトカイン; cAMP; サイトカイン; シグナル伝達; 炎症; 免疫抑制; 自己応答; T細胞; マクロファージ; 樹状細胞; サトカイン; cAMP

(1)これまでに、リポ多糖体(LPS)による樹状細胞(DC)やマクロファージ(Mφ)の活性化をcyclic adenosine monophosphate(cAMP)が抑制する分子機構が、LPS+cAMP刺激によって発現誘導される転写因子c-Fosによるものであることを明らかにした。c-FosのmRNA発現誘導はcAMP刺激のみでおきるが、タンパク質の蓄積にはLPS刺激によるIKKβのキナーゼ活性が必要であり、IKKβはc-Fosタンパク質の308番目のセリンをリン酸化し、c-Fosタンパク質を安定化させることを見いだした。そこで、308番目のセリンをアスパラギン酸に置換した安定型変異c-FosをDCで過剰発現させたトランスジェニック(Tg)マウスを作製し、骨髄由来DC(BMDC)のLPS応答性を解析した。Tgマウス由来のBMDCは、LPS刺激によるIL-12、TNFα等の炎症性サイトカインの産生が低下し、抗炎症性サイトカインであるIL-10の産生が亢進した。従って、c-Fosタンパク質の安定化による炎症性遺伝子の発現抑制がin vivo系でも機能していることが示唆された。(2)一方、自己応答性を規定するヘルパーT細胞の分化・機能を制御するTGFβ/Smadシグナルの役割の解析から、TGF-β刺激による制御性T細胞の分化制御因子であるFoxp3の誘導には、Smad2とSmad3が相補的に機能していずれかが必要であるが、炎症性Th17ヘルパーT細胞の分化制御因子であるRORγtの誘導には、何れのSmadも必要でないことが示された。また、TGF-β刺激によるTh1/Th2ヘルパーT細胞の分化抑制が、Smad2/Smad3欠損T細胞で著しく低下したが、Foxp3欠損T細胞では正常にみられた。従って、TGF-βはSmadを介してエフェクターT細胞の分化を制御するが、そこにFoxp3は必ずしも必要ないことが示唆された。

（1）我们先前已经表明，环状腺苷（CAMP）通过脂多糖（LPS）抑制树突状细胞（DCS）和巨噬细胞（LPS）的激活的分子机制是由于转录因子C-FOS引起的，这是由LPS+Camp刺激表达的。尽管C-FOS mRNA表达诱导仅通过cAMP刺激发生，但蛋白质的积累需要通过LPS刺激来使IKKβ激酶活性，我们发现IKKβ磷酸化C-FOS蛋白的位置308，并稳定C-FOS蛋白。因此，产生了转基因（TG）小鼠，其中稳定的突变体C-Fos在DC中将第308丝氨酸替换为天冬氨酸，而骨髓衍生的DC（BMDC）的LPS反应性过表达。源自TG小鼠的BMDC通过LPS刺激降低了炎症细胞因子（例如IL-12和TNFα）的产生，并增加了抗炎细胞因子IL-10的产生。因此，有人提出，通过稳定C-FOS蛋白的抑制炎症基因表达也在体内系统中起作用。 (2) On the other hand, analysis of the role of TGFβ/Smad signals that regulate the differentiation and function of helper T cells that define self-responsiveness showed that Smad2 and Smad3 are complementary to induce Foxp3, a regulatory regulator of T cells by stimulation of TGF-β, and that either Smad is required to induce RORγt, a differentiation regulator of inflammatory Th17 helper T cells.此外，在SMAD2/SMAD3缺陷型T细胞中，通过TGF-β刺激抑制Th1/Th2辅助T细胞的分化显着降低，但在FOXP3缺乏的T细胞中正常观察到。因此，建议TGF-β通过SMAD调节效应T细胞的分化，但不一定需要FOXP3。