染色体の恒常性に関わるキナーゼ間のクロストーク機構の解明

阐明参与染色体稳态的激酶之间的串扰机制

• 批准号: 20012055
• 负责人: 後藤 英仁
• 金额: $ 6.91万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20012055/
• 关键词: がん; チェックポイント; Chk1; Cdc25A; 14-3-3; Cdk1; サイクリン依存性キナーゼ; ATR; がん; チェックポイント; Chk1; Cdc25A; 14-3-3; Cdk1; サイクリン依存性キナーゼ; ATR

染色体の恒常性に関わるChk1の新規リン酸化反応の生理的意義を解析し、以下の成果を得た。1) 分裂期におけるChk1のセリン286・301のリン酸化反応我々は、以前、Cdk1が分裂期においてChk1のセリン286・301をリン酸化していることを報告した。今回、Chk1が分裂前期(prophase)において核内から細胞質に放出されること、この核外移行がCrm-1依存性に引き起こされることを見出した。この核外移行がリン酸化反応依存性であり、この核外排出過程が障害されると、分裂期への移行が遅延することが判明した。これらの結果は、Cdk1とChk1の間にはポジティブフィードバック機構が存在し、この機構の活性化が分裂期への円滑な移行に重要な役割を担っていることを示唆するものである。2) DNA障害の際に引き起こされるChk1のセリン296の自己リン酸化反応阻害剤等を用いた解析から、このセリン296のリン酸化反応は、ATRによるChk1のセリン317/345のリン酸化反応依存性に引き起こされるものの、ATRではなくChk1そのものがそのリン酸化反応を遂行していることが明らかになった。さらに、Chk1の自己リン酸化反応は、Chkl/14-3-3γ/Cdc25Aとの3者複合体の形成を通じて、Chk1によるCdc25AのSer76のリン酸化反応を制御し、Cdc25Aのユビキチン化および分解反応を調節していることを明らかにした。上記のシグナル伝達経路は、がんにおけるチェックポイント寛容の際に異常を生じていると考えられるが、その詳細については今後の研究課題といえる。

分析了与染色体稳态有关的CHK1新型磷酸化反应的生理意义，并获得了以下结果。 1）CHK1丝氨酸286.301在有丝分裂阶段的磷酸化以前报道，CDK1在有丝分裂阶段磷酸化CHK1丝氨酸286.301。现在，我们发现CHK1从核中释放到了预言中的细胞质，并且这种核外转移是由CRM-1依赖性引起的。已经发现，这种核渗出取决于磷酸化，并且如果这种核外出过程受到损害，则延迟到有丝分裂相的过渡。这些结果表明，CDK1和CHK1之间存在正反馈机制，并且这种机制的激活在平滑过渡到有丝分裂相中起着重要作用。 2）使用CHK1丝氨酸的自磷酸化抑制剂的分析296在DNA损伤期间引起的等等表明，尽管丝氨酸的磷酸化反应是由ATR，CHK1本身的CHK1丝氨酸317/345的磷酸化反应引起的，而ATR，CHK1本身，而不是ATR，而不是ATR进行磷酸化反应。此外，揭示了CHK1的自磷酸化来调节Ser76的CHK1对Cdc25a的磷酸化，并通过与CHKL/14-3-3-3-γ/CDC25A形成的三角属构成CDC25A的泛素化和降解。上述信号通路被认为在癌症检查点耐受性期间会引起异常，但可以说这是未来研究的话题。