細胞外環境モジュレーター分子ADAMの機能解析

细胞外环境调节分子ADAM的功能分析

基本信息

批准号：
18060038
负责人：
岡田保典
金额：
$ 5.12万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ADAM(a disintegrin and metalloproteinase)遺伝子ファミリーに属するADAM28について、disintegrin-like domain〜secreted-specific domainをbaitにした酵母two-hybrid法でP-selecting lycoprotein ligand-1 (PSGL-1)をスクリーニングし、binding assay、免疫沈降法および免疫染色法によるデータから両者の結合を証明した。さらに、両分子の結合部位を決定するとともに、PSGL-1を発現するHL-60細胞を用いて、ADAM28がPSGL-1との相互作用によりPSGL-1発現細胞の血管内皮細胞への接着促進作用を有することをin vitroとin vivoで証明した。また、生体内でのADAM28の産生源を検索したところ、肺炎、虫垂炎、胆嚢炎、関節リウマチ滑膜の各組織において、細動静脈の内皮細胞にADAM28の発現を免疫染色で認め、それぞれの非炎症部位では陰性であった。培養内皮細胞を用いてPMAや種々の炎症性サイトカイン処理したところ、PMAとTNF-αがADAM28発現を誘導した。また、これらのサイトカイン刺激した内皮細胞培養液をHL-60細胞に添加すると、HL-60細胞のP-selectinへ接着充進がみとめられた。これらのことから、炎症局所では、刺激性サイトカインで血管内皮細胞が刺激を受け、内皮細胞で産生されたADAM28がPSGL-1との結合により白血球の血管内皮への接着・浸潤を促進する可能性が示唆された。一方、ADAM12は変形性関節症の関節軟骨細胞で高発現され、insulin-like growth factor (IGF) bindingprotein-5を選択的に切断することで、IGF-1の活性を九進させて軟骨細胞の増殖に関わることを明らかにした。

对于属于ADAM（一种崩解蛋白和金属蛋白酶）基因家族的ADAM28，使用酵母的两性杂交方法筛选了p-选择液蛋白蛋白配体-1（PSGL-1），在这种方法中，该方法通过该二一个类似脱发蛋白样领域的分泌素样特异性结构域与数据相结合，并与数据结合，并与数据结合。此外，确定两个分子的结合位点，使用表达PSGL-1的HL-60细胞，我们在体外和体内证明了ADAM28具有表达PSGL-1的细胞对血管内皮细胞通过与PSGL-1相互作用的粘附启动子。此外，在搜索体内ADAM28产生的来源时，在肺炎组织中静脉纤维细胞静脉的内皮细胞中观察到ADAM28的表达，阑尾炎，胆囊炎，胆囊炎和类风湿性关节炎是通过免疫抑制作用的，在每个非infloment sere中是负面的。当PMA和各种炎症细胞因子用培养的内皮细胞处理时，PMA和TNF-α诱导的ADAM28表达。此外，当将这些细胞因子刺激的内皮细胞培养物添加到HL-60细胞中时，可以防止对HL-60细胞的P-选择蛋白的粘附。这些结果表明，在局部炎症中，血管内皮细胞被刺激的细胞因子刺激，而内皮细胞产生的ADAM28可能会通过与PSGL-1结合而促进白细胞对血管内皮细胞的粘附和侵袭。另一方面，ADAM12在骨关节炎关节软骨细胞中高度表达，并且通过选择性切割胰岛素样生长因子（IGF）结合蛋白5，它已经揭示了IGF-1活性是细胞性的，并且参与了软骨细胞的扩散。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ADAMs in cancer cell proliferation and progression

DOI：
10.1111/j.1349-7006.2007.00434.x
发表时间：
2007-05-01
期刊：
CANCER SCIENCE
影响因子：
5.7
作者：
Mochizuki, Satsuki;Okada, Yasunori
通讯作者：
Okada, Yasunori

ADAM28 is overexpressed in human non-small cell lung carcinomas and correlates with cell proliferation and lymph node metastasis

DOI：
10.1002/ijc.21324
发表时间：
2006-01-15
期刊：
INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
影响因子：
6.4
作者：
Ohtsuka, T;Shiomi, T;Okada, Y
通讯作者：
Okada, Y

TNF A-converting enzyme (TACE/ADAM17) inactivation in mousemyeloid cells prevents lethality from endotoxin shock.

小鼠骨髓细胞中 TNF A 转换酶 (TACE/ADAM17) 失活可防止内毒素休克导致死亡。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J. Immunol. 179
影响因子：
0
作者：
Horiuchi K.;Kimura T.;Miyamoto T.;Takaishi H.;Okada Y;Toyama Y. and Blobel C.P.
通讯作者：
Toyama Y. and Blobel C.P.

Binding of ADAM28 to P-selectin glycoprotein ligand-1 enhances P-selectin-mediated leukocyte adhesion to 。dothelial cells.

ADAM28 与 P-选择素糖蛋白配体-1 的结合可增强 P-选择素介导的白细胞粘附。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J. Biol. Chem. 282
影响因子：
0
作者：
Shimoda M.;Hashimoto G; Mochizuki S.;Dceda E.;Nagai N.;Is hida S. and Okada Y.
通讯作者：
Is hida S. and Okada Y.

Chondromodulin-1 maintain cardiac valvular function by preventing angiogenesis

Chondromodulin-1 通过阻止血管生成维持心脏瓣膜功能

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Nat. Med. 12
影响因子：
0
作者：
Yoshioka M.;Yuasa S.;Matsumura K.;Shiomi T.;Shukunami C.;Okada Y.;Mukai M.;Shin H.;Yozu R.;Sata M.;Ogawa S.;Hiraki Y.;Fukuda K.
通讯作者：
Fukuda K.