ADAM28のヒト乳癌組織での発現と癌細胞の増殖・運動・浸潤への関与

ADAM28在人乳腺癌组织中的表达及其与癌细胞增殖、运动和侵袭的关系

基本信息

批准号：
17014079
负责人：
岡田保典
金额：
$ 3.52万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究に関連して、ヒト肺癌においてADAM28が特異的高発現することを明らかにしてきた。そこで本研究においては、ヒト乳癌組織と乳癌細胞株におけるADAM28の発現と局在を明らかにするとともに、in vitroとin vivoにおいてADAM28が乳癌細胞の増殖にどのように関わるか検討を行った。RT-PCRと定量PCRにより、ヒト浸潤性乳癌では分泌型ADAM28と膜型ADAM28が選択的に高発現し、非癌部乳腺組織では発現が認められなかった。また、in situ hybridizationや免疫組織染色の結果から、ADAM28は癌細胞特異的に染色された。イムノブロット法では、乳癌組織でADAM28は活性型で存在していた。さらに、ADAM28高発現乳癌細胞株(MDA-MB231)のIGF-I誘導の細胞増殖作用、IGFBP-3の分解、IGF type I receptor(IGF-IR)のリン酸化とERK1/2のリン酸化は、抗ADAM28抗体や合成ADAMインヒビター(KB-R7785)の処理やADAM28のsiRNAにより抑制されたがADAM28低発現乳癌細胞株(MCF-7)において影響はなかった。また、乳癌組織をKB-R7785や抗ADAM28抗体存在下で培養した結果、IGFBP-3の分解が抑制された。MDA-MB231細胞をマウスの皮下に移植したマウス担癌実験モデルにおいて、ADAM28 siRNA/cationic cardiolipin analogue complexの投与により、腫瘍の増殖が有意に抑制された。これらのことから、乳癌細胞に高発現したADAM28がIGFBP-3を切断することにより、IGF-I/IGFBP-3複合体から遊離したIGF-IがIGF-IRのリン酸化やERK1/2のリン酸化を介して乳癌細胞増殖を促進している可能性が示唆された(投稿中)。

在这项研究的背景下，我们表明ADAM28在人类肺癌中特别表达。因此，在这项研究中，我们阐明了ADAM28在人类乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中的表达和定位，并研究了ADAM28如何参与体外和体内乳腺癌细胞增殖。 RT-PCR和定量PCR表明，分泌的ADAM28和ADAM28在人类浸润性乳腺癌中有选择性表达，并且在非癌性乳腺组织中未观察到表达。此外，基于原位杂交和免疫组织化学染色，ADAM28专门针对癌细胞染色。在免疫印迹中，ADAM28以乳腺癌组织的活性形式存在。此外，IGF-I诱导的ADAM28高表达乳腺癌细胞系（MDA-MB231）的细胞增殖作用，IGFBP-3的降解，IGF I型受体（IGF-IR）的磷酸化（IGF-IR）的磷酸化以及用ERK1/2抑制ERK1/2的磷酸化，并用抗-Adibib Antisty抑制了抗-Adibiby AntISE ANTISN ANTISN ANTISN ANTISEN ANTISN ANTISEN ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES ANTIES 28 （KB-R7785）和ADAM28 siRNA，但对ADAM28-低表达乳腺癌细胞系没有影响（MCF-7）。此外，在存在KB-R7785或抗ADAM28抗体的情况下培养乳腺癌组织，并抑制IGFBP-3的降解。在含小鼠癌症的实验模型中，将MDA-MB231细胞皮下植入小鼠中，施用ADAM28 siRNA/阳离子心磷脂模拟复合物显着抑制了肿瘤的生长。这些结果表明，在乳腺癌细胞，裂解IGFBP-3和IGF-1中高度表达的ADAM28从IGF-I/IGFBP-3复合物中释放出来，通过IGF-IR和ERK1/2的磷酸化促进乳腺癌细胞的增殖。