扁桃体特異的遺伝子操作マウスの作成と解析

杏仁核特异性基因工程小鼠的创建和分析

• 批准号: 18022015
• 负责人: 森 寿
• 金额: $ 5.5万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18022015/
• 关键词: 扁桃体; NMDA受容体; 情動; 遺伝子ノックアウトマウス; 遺伝子操作マウス; BAC; Cre

本研究は、扁桃体神経亜核細胞特異的に遣伝子操作を可能とするC57BL/6近交系の遺伝的背景を持ったマウス系統を樹立し、情動学習における扁桃体亜核のNMDA受容体の機能を解析することを目的とした。特に本研究では、扁桃体内の特定の神経亜核に選択性高く発現することが報告されているGastrin releasing peptide (GRP), LIM homeobox protein 7/8(Lhx7/8), Prolactin receptor (PR)を利用して、遺伝子操作を可能とするマウス系統の樹立を進め、扁桃体の外側核、中心核、内側核においてそれぞれ選択的な発現を示すGRP,Lhx7/8, PRそれぞれの遺伝子座に、誘導型遺伝子組み換え酵素CrePRを挿入したベクターを作成し、C57BL/6由来ES細胞に導入し、3種類とも目的の標的遺伝子組み換えを起こしたES細胞を取得した。得られたES細胞株とICR系統8細胞期胚を用いて、キメラマウスの作製を試み、3種類の標的組換えES細胞すべてからキメラマウスを得、Lhx7/8-CrePR、PR-CrePRでは生殖系列伝達を確認した。一方、扁桃体の特定神経核でNMDA受容体の機能を阻害するために、脳内で高発現するCAGプロモーター下に、Creの認識配列(loxP)ではさまれたDsRedMST遺伝子と、その下流にチャネル構成M2領域内に点変異を導入したドミナントネガティブ型NMDA受容体サブユニットGluRζ1-N598RとEGFPとの融合遺伝子を接続したベクターを構築し、トランスジェニックマウスを作成しファウンダー候補となる8系統の解析を進めた。このうち1系統で、Cre活性依存的にトランスジーンが発現することを確認した。今後、この系統における誘導型ドミナントネガティブNMDA受容体発現様式の解析を進める。

在本研究中，我们建立了具有 C57BL/6 近交遗传背景的小鼠品系，该品系能够以杏仁核亚核细胞特异性的方式进行基因操作，目的是分析其功能。特别是，本研究研究了胃泌素释放肽 (GRP)、LIM 同源框蛋白 7/8 (Lhx7/8) 和催乳素受体 (PR)，据报道它们在杏仁核内的特定神经元亚核中高度选择性表达。继续建立可利用 GRP Lhx7/8 进行基因操作的小鼠品系，Lhx7/8 在杏仁核的外侧核、中央核和内侧核中选择性表达。制作载体，其中将诱导型基因重组酶CrePR插入每个PR的基因座中，并将该载体导入C57BL/6来源的ES细胞中，以获得在所有三个中都发生了所需靶基因重组的ES细胞类型。我们尝试使用获得的ES细胞系和ICR谱系8细胞阶段胚胎来产生嵌合小鼠，并且从所有三种类型的目标重组ES细胞获得嵌合小鼠谱系传递。另一方面，为了抑制杏仁核特定神经核中NMDA受体的功能，夹在Cre识别序列（loxP）之间的DsRedMST基因及其下游的通道结构位于CAG启动子下方，具有高度的选择性。表达于大脑 M2 区域内的点突变。构建了显性失活NMDA受体亚基GluRζ1-N598R和EGFP之间的融合基因的载体，创建了转基因小鼠，并对作为候选创建者的8个品系进行了分析。在其中一个品系中，我们证实转基因以 Cre 活性依赖性方式表达。今后，我们将分析该菌株中诱导型显性失活NMDA受体的表达模式。

项目成果

脳においてセリンラセマーゼは神経細胞に存在し、興奮毒性を制御する

在大脑中，丝氨酸消旋酶存在于神经元中并控制兴奋性毒性。

• 发表时间: 2008
• 作者: 宮一志、趙英;らん、本郷和久、宮脇利男、森寿
• 通讯作者: らん、本郷和久、宮脇利男、森寿

セリンラセマーゼノックアウトマウスを用いた脳内D-セリンの機能解析

使用丝氨酸消旋酶敲除小鼠进行大脑中 D-丝氨酸的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: S;Ito;et. al.;崎村 建司;渡邊 裕美;趙 英らん
• 通讯作者: 趙 英らん

脳神経科学イラストレイテッド改訂第2版、(分担執筆)序論(p20-41),神経伝達物質と受容体(p197-203)

《神经科学图解》第二修订版，（合着）简介（第 20-41 页）、神经递质和受体（第 197-203 页）

• 发表时间: 2006
• 作者: Zhao;Y. L. and Mori;H.;森 寿
• 通讯作者: 森 寿

ブレインサイエンス・レビュー2006(分担執筆)、p33-47

脑科学评论 2006（合著者），第 33-47 页

• 发表时间: 2006
• 作者: Zhao;Y. L. and Mori;H.;森 寿;森 寿
• 通讯作者: 森 寿

Effects of FAK ablation on cerebellar foliation, Bergmann glia positioning and climbing fiber territory on Purkinje cells

• DOI: 10.1111/j.1460-9568.2008.06069.x
• 发表时间: 2008-02-01
• 期刊: EUROPEAN JOURNAL OF NEUROSCIENCE
• 影响因子: 3.4
• 作者: Watanabe, Fumihiro;Miyazaki, Taisuke;Mishina, Masayoshi
• 通讯作者: Mishina, Masayoshi