細胞接着・運動におけるDockファミリー蛋白質の機能及びその活性制御機構の解析

Dock家族蛋白在细胞粘附和运动中的功能及其活性控制机制分析

基本信息

批准号：
18013028
负责人：
加藤裕教
金额：
$ 7.23万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013028/
关键词：
シグナル伝達細胞・組織発生・分化癌

项目摘要

がん細胞の浸潤・転移は、がんの治療を困難にしている最大の要因であり、このがん細胞の浸潤・転移に深く関連のある細胞接着や運動の仕組みを解明し、その仕組みに関わる分子をターゲットとした治療法を確立することが望まれている。がん細胞の浸潤・転移に深く関連のある細胞接着や運動に関して、Rhoファミリーの低分子量G蛋白質の関与がこれまでにも数多く報告されている。最近Dock180に代表される、新しいタイプのRhoファミリーG蛋白質活性化因子(Dockファミリー)の存在が明らかになった。我々はこれまでに、RhoファミリーG蛋白質の1つRhoGがその標的蛋白質ELMOを介してDock180を活性化することを見出した。今年度はRhoGの新たな機能を探る目的で、RNA干渉により内在性のRhoGの発現を特異的に抑制させたHeLa細胞を樹立し解析を行った。HeLa細胞はヒト子宮頸ガン由来細胞株であり、in vitroおよびin vivoで接着非依存的に生存および増殖が可能で、anoikis耐性であることが知られている。ところがRhoGをノックダウンさせた細胞では浮遊状態にて培養すると細胞死が起こり、anoikisの割合が増加することを発見した。このときヒトRhoGに対するRNAiの影響を受けないマウスのRhoGをRhoGノックダウン細胞に発現させると、HeLa細胞のanoikis耐性能が元に戻ることがわかった。このことから、RhoGはHeLa細胞におけるanoikisの制御に重要であることがわかった。またRhoGによるanoikisの抑制はPI3Kの活性が重要であることがわかった。以上の結果から、RhoGががん細胞のanoikis耐性能に重要な役割を担っていることが考えられる。

癌细胞的侵袭和转移是使癌症治疗困难的最大因素，希望能够阐明与癌细胞的侵袭和转移密切相关的细胞粘附和运动机制，并建立靶向该机制涉及分子的治疗方法。迄今为止，已经有许多报道称低分子量G蛋白来自Rho家族在细胞粘附和运动方面的参与，这与癌细胞浸润和转移密切相关。最近，已经揭示了由Dock180代表的新型Rho家族G蛋白激活剂（Dock家族）的存在。我们以前已经发现，Rho家族G蛋白之一RHOG通过其靶蛋白Elmo激活Dock180。今年，我们建立了和分析HeLa细胞，这些细胞通过RNA干扰专门抑制了内源性RHOG的表达，目的是探索RHOG的新功能。 HeLa细胞是人类宫颈癌衍生的细胞系，已知具有抗厌氧菌性，能够以与粘附无关的方式在体外和体内生存和增殖。然而，发现在悬浮状态下培养的细胞会发生撞倒的细胞，从而导致细胞死亡和Anoikis比例增加。目前，发现小鼠RHOG在RHOG敲除细胞中不受RNAi影响到人Rhog的表达被恢复为其原始的Anoikis耐药性。这表明RHOG对于调节HeLa细胞中的Anoikis很重要。此外，发现PI3K的活性对于抑制Rhog的Anoikis很重要。从以上结果来看，据信，RHOG在癌细胞的抗厌氧菌耐药性中起重要作用。