Construction of high resolution separation analysis and function control methods for natural supramolecules

天然超分子高分辨率分离分析与功能控制方法的构建

基本信息

批准号：
21K05128
负责人：
島崎洋次
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は以下の3件の論文を公表することができた。特に１と３の業績はテーマである天然酵素の超分子分析に深く関わりのあるものである。マウス肝臓などの生体試料中の超分子を非変性条件の２次元電気泳動法により分離し、それらを電気泳動によりさらに溶液状態で抽出し、超分子の構成成分や物性を調べることができた。特に、カルボキシルエステラーゼとトランスフェリンからなる超分子のエステラーゼ活性はFe2+により阻害されるが、トランスフェリンによりFe2+が捕獲されることにより、阻害が解除されることがわかった。これは超分子の生理的な役割を考察していくうえで重要な知見と考えらえる。1）島﨑洋次、中尾香琳、福家麗. 非変性2次元電気泳動法によって分離、検出されたカルボキシルエステラーゼとトランスフェリン複合体の電気泳動的抽出. 電気泳動 (in press).2）Kenichiro Nagata, Ryo Ashikaga, Wakako Mori, Tamotsu Zako, Youji Shimazaki. Analysis of the enzymatic degradation of lysozyme fibrils using a non-denaturing gel electrophoresis and double staining with coomassie brilliant blue G-250 and R-250 dyes. Analytical Sciences 2023;39: 267-274.3）Karin Nakao, Youji Shimazaki. Electrophoretic extraction of protein complexes after separation and detection by a combined methods of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reversible staining. Journal of Electrophoresis 2022;66: 5-11.

去年，我们发表了以下三篇论文。特别是成果1和成果3与天然酶的超分子分析主题密切相关。我们能够在非变性条件下利用二维电泳分离小鼠肝脏等生物样品中的超分子，并进一步利用电泳将其提取到溶液中，以研究超分子的组成成分和物理性质。特别地，发现由羧酸酯酶和转铁蛋白组成的超分子酯酶活性被Fe 2+ 抑制，但通过转铁蛋白捕获Fe 2+ 来解除抑制。在考虑超分子的生理作用时，这被认为是一个重要的发现。 1）Yoji Shimazaki，Karin Nakao，Rei Fukuya。通过非变性二维电泳分离和检测羧酸酯酶和转铁蛋白复合物的电泳提取（正在出版）。2）Kenichiro Nagata，Ryo Ashikaga，Wakako Mori，Tamotsu Zako，Youji Shimazaki。使用分析溶菌酶原纤维的酶促降解。非变性凝胶电泳和考马斯亮蓝 G-250 和 R-250 染料双重染色分析科学 2023；39：267-274.3）Karin Nakao，Youji Shimazaki 通过组合分离和检测后的蛋白质复合物。非变性二维电泳和可逆染色方法。 2022；66：5-11。