生殖管の器官形成におけるMAGUK蛋白質DLGの機能解析

MAGUK蛋白DLG在生殖道器官发生中的功能分析

基本信息

批准号：
17052025
负责人：
向後晶子
金额：
$ 3.39万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までに、Dlg遺伝子のノックアウトマウスでは雌で膣の形成不全、雄で精嚢の形成不全が見られたことから、Dlgは生殖管の正常発生に不可欠であることが示された。そこでDlgが細胞内の何らかの蛋白質を膜近傍に局在させることで、細胞の機能を調節しているのではないかとの仮説を立て、Dlg KOマウスと野生型マウスとの間で、細胞内分布の異なる蛋白質を探すという方法で、この仮説の検証を行ってきた。対象としては、(1)KOマウスの表現型がDlgと類似しているものなど、機能的な関連が予想されるもの、(2)Dlg KOマウスで発現が抑制あるいは亢進している可能性があるもの、(3)Dlg分子との相互作用が予想されるもの、を選んだ。(1)、(2)については、BMP受容体、Ephrin受容体などを解析したが、WTとKOの間で細胞内局在に差があるものは発見できなかった。また、(3)において、Dlgと同一複合体に含まれることが報告されているE-cadherinについては、野生型、KOマウスの間で細胞内局在パターンの相違は見られなかった。一方、C末にPDZ class I domain binding motifをもつWntシグナル受容体frizzled 1の細胞内分布を検証したところ、野生型マウス尿管上皮細胞では細胞のアピカル面、細胞質、側壁部などに分布し、側壁部ではDlgと共存していたのに対し、KOマウスでは、frizzledのシグナルは細胞頂部面でやや強く、あとは細胞内部に一様に分布しているだけで、側壁部への集積はほとんど認められなかった。さらに、PDZ class I domain binding motifをもたないfrizzled 3は、細胞の側壁部には分布していないことも明らかになった。このことから、マウス胎仔の尿管上皮細胞では、frizzled 1の細胞側壁部への局在が、Dlgに依存している可能性が示された。以上の結果から、発生期の上皮細胞では、Dlgがfrizzledの細胞内局在を規定することで、Wntシグナルの細胞内への伝達効率を調節しているのではないかと考えられる。

到去年，具有DLG基因的敲除小鼠在雌性和雄性囊泡中表现出阴道发育不良，表明DLG对于生殖道的正常发育至关重要。因此，我们假设DLG通过在膜附近的细胞中定位一些蛋白质来调节细胞功能，并通过搜索DLG KO小鼠和野生型小鼠之间具有不同细胞分布的蛋白来检验该假设。选择了受试者：（1）具有预期功能关联的人，例如在KO小鼠中具有相似表型的那些受试者，（2）那些在DLG KO小鼠中可能具有抑制或增强的人，以及（3）与DLG分子相互作用的人。关于（1）和（2），我们分析了BMP受体，ephrin受体等，但是我们找不到WT和KO之间的亚细胞定位差异。此外，在（3）中，E-钙粘着蛋白的野生型和KO小鼠之间没有观察到亚细胞定位模式的差异，据报道，该模式与DLG相同的复合物中包含。 On the other hand, we examined the subcellular distribution of the Wnt signal receptor frizzled 1, which has a PDZ class I domain binding motif at the C terminal, and found that in wild-type mouse ureteral epithelial cells it was distributed in the apical surface, cytoplasm, sidewalls of cells, and coexisted with Dlg at the sidewalls, whereas in KO mice the frizzled signal was slightly在细胞的顶端表面更强，仅在细胞内均匀分布，在侧壁上几乎没有积聚。此外，还揭示了没有PDZ I类结合基序的毛躁3没有分布在细胞的侧壁中。这表明在小鼠胎儿小鼠的输尿管上皮细胞中，毛躁1的定位可能取决于DLG。从上述结果中可以认为，在新生的上皮细胞中，DLG通过定义毛躁的亚细胞定位来调节Wnt信号传递到细胞中的效率。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Adenomatous polyposis coli plays multiple roles in the intestinal and colorectal epithelia.

腺瘤性大肠杆菌在肠道和结直肠上皮细胞中发挥多种作用。

DOI：
发表时间：
期刊：
Medical Molecular Morphology (in press)
影响因子：
0
作者：
Takao Senda;Akiko Iizuka-Kogo;Takanori Onouchi;Atsushi Shimomura
通讯作者：
Atsushi Shimomura

Abnormal development of urogenital organs in Dlghl-deficient mice.

Dlghl 缺陷小鼠泌尿生殖器官发育异常。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Development 134
影响因子：
0
作者：
Kawasaki Y.;Sagara M.;Shibata S.;Shirouzu M.;Yokoyama S.;Akiyama T.;Murayama K.;Toya H.;Iizuka-Kogo A
通讯作者：
Iizuka-Kogo A