Determination of cell type(s) in which DLG1 exerts its role during the cardiovascular formation.

确定 DLG1 在心血管形成过程中发挥作用的细胞类型。

基本信息

批准号：
21K06728
负责人：
向後晶子
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

細胞内極性因子として知られるDLG1蛋白質の遺伝子欠損マウスは、高率に先天性心奇形を発症する。本研究は、心臓、とくに心臓流出路の発生におけるDLG1の機能を、細胞系譜特異的Dlg1遺伝子ノックアウトマウスを用いて解明することを目的としている。心臓流出路は、神経堤（NC)に由来する細胞と、二次心臓領域（SHF)に由来する細胞によって構成され、発生過程では両系譜細胞間の相互作用が必要である。一方、遺伝子レベルでは、どちらかの系譜での発現だけが流出路発生に必要な遺伝子の例も報告されている。本研究では、それぞれの細胞系譜で特異的にDlg1遺伝子を欠損するマウスを作製し、２つの細胞系譜におけるDlg1欠損が、心奇形発症にそれぞれどの程度寄与するのかを明らかにし、その結果を基に、各細胞系譜のDlg1機能や、各細胞系譜の発生の相関関係について解析する計画である。本年度（2022年度）は、Mef2c-AHF-Creトランスジーンを用いてSHF特異的Dlg1欠損マウス（Mef2cCre:Dlg1 cKO）およびSHF蛍光標識正常マウス（Mef2cCre:tdTomatoマウス）、Wnt1-Creトランスジーンを用いてNC特異的Dlg1欠損マウス（Wnt1Cre:Dlg1 cKO）およびNC蛍光標識正常マウス（Wnt1Cre:tdTomatoマウス）のサンプル採取と解析を開始した。予備的な観察では、Mef2cCre:Dlg1 cKOマウスは生後も生存可能であり、Dlg1 KOマウスにみられる周生期全例での致死性は、 Wnt1Cre:Dlg1 cKOマウスのみで観察された。またいずれのcKOマウスにおいても、心奇形発症率はDlg1 KOマウスよりも低くまた軽微な傾向が見られる。今後各マウスでのDLG1発現量の検証なども加え、各系譜でのDLG1機能をさらに追究していきたい。

DLG1蛋白缺乏的小鼠，被称为细胞内极性因子，以高速率发展先天性心脏畸形。这项研究旨在阐明使用细胞谱系特异性DLG1基因敲除小鼠，尤其是心脏流出道的DLG1在心脏发展中的功能。心脏流出道由源自神经rest（NC）的细胞和源自次级心脏区域（SHF）的细胞组成，在发育过程中需要两个谱系细胞之间的相互作用。另一方面，在遗传水平上，报告了流出道的发展中的表达示例。在这项研究中，产生了每个细胞系中特异性缺乏DLG1基因的小鼠，以及两种细胞系中的DLG1缺乏症的程度有助于心脏畸形的发展，并基于结果，我们将分析每种细胞系的DLG1功能以及每个细胞系的发展之间的相关性。今年（2022年），使用MEF2C-AHF-CRE TransCre TransCre Transice和NC-speceific g1（2022）使用MEF2C-AHF-CRE Transgene和NC-spececience和NC-speceifiencific and Mef2c-ahf-ahf-ahf-ahf-cre transece和nc-ahf-ahf-cre transece和nc-nc-specificific g1 defiencic and shf特异性DLG1缺陷小鼠（MEF2CCRE：DLG1 CKO）和SHF荧光标记的正常小鼠（MeF2CCRE：TDTOMATO MICES）（WNT1CRE：DLG1 CKO）和NC荧光使用WNT1-CRE TRANSGENE标记正常小鼠（WNT1CRE：TDTOMATO小鼠）。初步观察结果表明，MEF2CCRE：DLG1 CKO小鼠出生后仍然是可行的，并且仅在WNT1CRE：DLG1 CKO小鼠中观察到DLG1 KO小鼠的致死性。此外，在所有CKO小鼠中，心脏畸形的发生率低于DLG1 KO小鼠的发生率，并且有轻微的趋势。将来，我们还将验证每只鼠标中的DLG1表达水平，并进一步追求每个谱系中的DLG1函数。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

細胞極性因子DLG1の欠損が半月弁の発生に及ぼす影響

细胞极性因子DLG1缺失对半月瓣发育的影响

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Onishi Yuki;Yamamura Yusuke;Hosogi Misa;Higashi Hiroshi;Ogita Kiyokazu;Kinjo Toshihiko;Uno Kyosuke;Yoneda Yukio;Kuramoto Nobuyuki;戸井田達典，園田純一郎，興梠靖幸，緒方賢次，髙村徳人，徳永仁;小菅真広，辻本雅之，今宿夏野，川本真由香，中村紗英，西口工司;向後晶子・向後寛・池澤麻衣子・山本華子・松崎利行
通讯作者：
向後晶子・向後寛・池澤麻衣子・山本華子・松崎利行

細胞系譜特異的Dlg1遺伝子欠損マウスを用いた心臓発生異常の解析

使用细胞谱系特异性 Dlg1 基因缺陷小鼠分析心脏发育异常

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sari Nakagawa;Yoshiaki Okamoto;Chika Tokuyama;徳永仁，帳智香，河田実優，丸山凜七，園田純一郎，興梠靖幸，緒方賢次，髙村徳人;向後晶子・山下日和子・向後寛・山本華子・松崎利行
通讯作者：
向後晶子・山下日和子・向後寛・山本華子・松崎利行