脊椎動物の肺の獲得プロセスに関する進化発生学的研究

脊椎动物肺部获得过程的进化和胚胎学研究

基本信息

批准号：
17018036
负责人：
岡部正隆
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ハナカケトラザメ(Scyliorhinus canicula)のNkx2.1、Tbx4、オーストラリアハイギョ(Neoceratodus forsteri)のNkx2.1、Tbx4、Tbx5、Fgf10、Foxa1、Foxa2、Foxa3、Bmp4、Shhの各cDNAをRT-PCR法を用いて単離した。ゼブラフィッシュ(Danio rerio)のNkx2.1a、Nkx2.1b、Tbx4、Fgf10、Bmp4、Shh、ニワトリ(Gallus gallus)のNkx2.1、Tbx4、Tbx5、Fgf10a、Bmp4、Shhの各cDNAを国内外の研究者から提供を受けた。上記の各動物の各遺伝子に関してWISH法を用いてその発現パターンを解析した。ニワトリ、ゼブラフィッシュ、ツメガエル類に関しては方法が確立されているが、トラザメ、オーストラリアハイギョに関しては方法が確立されていない。ツメガエル用およびメダカ用プロトコールを参考にして条件検討を行ってきたが、現在のところ残念ながら結果を得ることができていない。当初本研究計画においては、ニワトリ胚を四足動物胚として実験に用いる計画であったが、ゲノム・遺伝子情報が豊富で、発生が早く、トランスジェニック動物の作成が可能で、1細胞期に外来遺伝子を導入したり、モルフォリーノを用いた遺伝子機能阻害が可能であるツメガエル類(Xenopus)を、肺を有する四足動物の代表として実験に用いることが可能であるかの検討を始めた。マウス・ニワトリで明らかとなった肺芽形成遺伝子ネットワークがツメガエル類にも保存されているかを確かめるために、アフリカツメガエル(Xenopus leavis)のNkx2.1、Tbx4、Tbx5のcDNAを国内外の研究者から提供を受け、ニシツメガエル(Xenopus tropicalis)のNkx2.1、Tbx4、Tbx5、Fgf10の各cDNAをRT-PCR法で単離し、発現パターンの解析を行った。

使用RT-PCR分离了Scyliorhinus canicula和Nkx2.1和NKX2.1，TBX4，TBX5，TBX5，FGF10，FGF10，FGF10，FGF10，FOXA3，BMP4和SHH的NKX2.1和TBX4的cDNA的cDNA。斑马鱼（Danio Rerio）NKX2.1A，NKX2.1B，TBX4，FGF10，BMP4，SHH和Chicken（Gallus Gallus）NKX2.1，TBX4，TBX5，TBX5，FGF10A，BMP4，BMP4，BMP4和SHH CDNA由国内和国际研究员提供。使用愿望方法分析了上述动物中每个基因的表达模式。已经建立了用于鸡，斑马鱼和爪蟾的方法，但尚未建立用于鲨鱼和澳大利亚蛇的方法。我们一直在考虑使用方案进行爪蟾和Medaka的方案，但不幸的是，目前我们尚未取得结果。最初，在该研究项目中，鸡蛋被用作实验中的四足动物胚胎，但是我们开始研究Xenopus（Xenopus）是否富含基因组和遗传信息，可以快速开发，可以创建，并可以在实验中使用，并可以在实验中使用，该实验可以在一个细胞阶段引入外国基因，可以在单细胞阶段或使用Morpholin untuctions使用Morphol Antifortion，而在Morpholiation unction中使用Morphol Antract，以实验，以抑制属性。肺。为了确认在小鼠和鸡中揭示的肺芽形成基因网络是否也在Xenopus leavis，Xenopus leavis的NKX2.1，TBX4和TBX5的cDNA中保守分析。