がん特異的抗原を利用したがんの診断・治療法の開発

利用癌症特异性抗原开发癌症诊断和治疗方法

基本信息

批准号：
17015035
负责人：
西村泰治
金额：
$ 7.42万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、cDNAマイクロアレイによる癌細胞と正常組織における遺伝子発現の比較解析、あるいは腫瘍細胞由来のcDNA発現ライブラリーより、癌患者血清中のIgG抗体に反応するものを選びだす方法(SEREX法)を用いて同定した腫瘍抗原の中から、癌特異的に高発現しているものを厳選し、ヒト癌の診断ならびに免疫療法に利用できるものを同定することを目的とする。我々が膵臓癌患者血清と膵臓癌細胞株由来のcDNA発現ライブラリーを用いて同定したHSP105蛋白質は、主に細胞質に局在し、正常組織では精巣以外にはほとんど発現しないのに対し、膵癌、大腸癌、食道癌、甲状腺癌、乳癌(硬癌以外)などの多様な癌のほとんどの症例で高発現する。腫瘍拒絶抗原としてのHSP105の可能性を検討すべく、まずHSP-105遺伝子発現ベクター(DNAワクチン)を作製し、これをマウスに皮下注射することにより、その抗腫瘍効果を観察した。その結果、個体差はあるものの、約50%のマウスにおいてDNAワクチンの前投与により、その後に皮下移植されたHSP105を高発現するマウス大腸癌細胞株Colon-26の増殖が抑制され、マウスの寿命が延長した。さらに、リコンビナントマウスHSP105蛋白質を作製し、これをマウス骨髄由来樹状細胞に負荷した後にマウスに前投与し、その後にColon-26を皮下移植したところ、DNAワクチンと比較してさらに安定した抗腫瘍効果が誘導された。またHSP105遺伝子の強制発現ならびにSi-RNAによる遺伝子発現の抑制実験により、HSP105がヒト癌細胞において抗アポトーシス作用を発現することにより、癌化の促進に関与している可能性を示した。またHSP105特異的si-RNAを、NOD-SCIDマウスの皮下に移植したヒト胃癌細胞株が形成した腫瘤内に注入することにより、in vivoにおける腫瘍の増殖を抑制することに成功した。

这项研究是对癌细胞使用cDNA微射线和正常组织中遗传表达的比较分析，或者选择一种对癌症患者血清中IgG抗体反应的方法，而不是源自肿瘤细胞的cDNA表达文库（SEREX方法）。我们使用cDNA表达文库鉴定出的HSP105蛋白质主要位于细胞质中，并且在正常组织中，很少表达，但在大多数情况下，在大多数情况下表达了胰腺癌。多种癌症，例如结直肠癌，食管癌，甲状腺癌和乳腺癌（硬性癌）。为了检查Hsp105作为抗原排斥抗原的可能性，首先产生了HSP-105基因表达载体（DNA疫苗），并将小鼠注入小鼠以观察抗肿瘤作用。结果，小鼠结肠癌的增殖，结肠26，在小鼠的小鼠中高度表达的小鼠中的HSP105被抑制了小鼠的预期寿命。此外，将小鼠HSP105蛋白重新覆盖，然后将其加载到小鼠骨髓来源的猫细胞上，然后给予小鼠，然后将结肠26移植，然后与DNA疫苗相比更稳定效果被指导。此外，HSP105基因强迫表达和通过Si-RNA对基因表达的抑制性检验表明，HSP105通过在人类癌细胞中表达抗斑点酶效应而参与促进癌症的可能性。此外，将Hsp105特异性SI-RNA注入了由NOD-SCID小鼠皮肤下移植的人类胃癌细胞形成的肿瘤中，该细胞成功地抑制了体内肿瘤的生长。