腫瘍特異的MHC非拘束性キラーT細胞のレセプター構造と傷害機序の解析

肿瘤特异性非MHC限制性杀伤T细胞受体结构及损伤机制分析

基本信息

批准号：
01015013
负责人：
斉藤隆
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.MHC非拘束性のキラーT細胞としてCD4^-CD8^-胸腺細胞のクローンを樹立した。このクローンはリンホカイン依存性で、増殖にIL2とIL3を必要とする。さらにgamma delta T細胞レセプター(TCR)を発現し、広い範囲の腫瘍に対するNK様傷害活性をもつ。一方、抗CD3、抗Thy1抗体で刺激し活性化すると、IL2とgammaIFNを産生し、THー1様のリンホカインパターンを示した。傷害機序に関してはMHCに非拘束性であり、レセプター特異性は未知である。傷害活性にはgamma delta/CD3複合体は関与しないが、抗LFAー1抗体で阻害される。即ち、リンホカイン産生はTCRを介して誘導されるが、NK活性は異なる。2.B16メラノーマの可溶性抗原で誘導し、増殖するT細胞クローンを得た。独立して2クローンを樹立した。これらはCD4^T増殖性T細胞で、機能的には腫瘍に対するキラーT細胞の誘導を抑制する。クローン由来のmRNAを作製し、アンカーPCR法を用いてTCRの塩基配列を決定した。alpha鎖beta鎖の配列は両クローンともValphallーJalpha281,Vbeta13であり、alpha鎖でのVJ結合のN配列が1つ異なるだけであった。腫瘍を認識する免疫系のレパートリーが限られていることを示唆した。3.メラノーマ特異的キラーT細胞を誘導しやすくする目的で、リンホカインIL2、IL4、IL6遺伝子を導入したB16メラノーマ細胞を作製した。リンホカイン産生はノザンプロット、生物活性で確認できた。これらでキラーT細胞を誘導させると、ILー2産生腫瘍が著しく強い抗腫瘍活性を誘導でき、IL4、IL6では変化なかった。これはNK様活性が主で、腫瘍特異的細胞は少いと思われる。リンホカイン産生B16をvivoに植えると、IL2産生腫瘍では腫瘍増殖が著しく抑えられ、逆にIL4、IL6産生腫瘍では増殖を著しく促進した。ILー2産生腫瘍により免疫系の賦活化が可能であることを示すと同時にIL4、IL6による著しい増殖効果の基礎を解析する必要がある。

1。MHC非杀手T细胞CD4^-CD8^建立的胸膜细胞克隆。该克隆取决于林霍卡因，需要IL2和IL3进行增殖。此外，表达伽马三角细胞受体（TCR），并且在广泛的肿瘤中具有NK样损伤活性。另一方面，当用抗-CD3和抗-THY1抗体刺激并激活时，它会产生IL2和Gammaifn，并显示出1的Lin Hocaine模式。 MHC在损伤机制中没有束缚，受体特异性尚不清楚。伽马三角/CD3复合物不参与损伤活性，而是受到抗-LFA -1抗体的抑制。也就是说，HoCaine的产生是通过TCR诱导的，但NK活性不同。 2。B16黑色素瘤的可溶性抗原，该抗原被引导并获得T细胞克隆。他独立设置了两个克隆。这些是CD4^T增殖的T细胞，在功能上抑制了杀伤细胞为肿瘤。创建了源自克隆的mRNA，并使用锚定PCR方法确定TCR的碱基序列。 Alpha链β链的阵列是valphall -Jalpha281，vbeta13，均为克隆，与Alpha链中的VJ键只有一个不同。它表明，识别肿瘤的免疫系统库有限。 3.黑色素瘤的B16黑色素切开术细胞已引入Lin Hocaine IL2，IL4和IL6基因，以使引导特异性杀手T细胞变得更容易。 Nozan图，生物学活性证实了Linhocaine的产生。当在这些中诱导杀伤细胞时，IL -2产生肿瘤会诱导明显的强抗肿瘤活性，并且在IL4和IL6中没有改变。它主要是类似NK的活性，似乎肿瘤特异性细胞很小。在体内播种Hocaine B16，肿瘤增殖在IL2肿瘤中得到了明显抑制，相反，IL4和IL6产生的肿瘤已显着促进增殖。有必要表明IL -2产生肿瘤可以通过免疫系统激活，同时，有必要分析IL4和IL6显着生长效应的基础。

项目成果

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科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Saito,T.,Ohno,H.,Ushiyama,C.,Taniguchi,M.&Germain,R.N.: "CD2 can mediate TCR/CD3ーindependent T cell activation." Nature.

Saito, T.、Ohno, H.、Ushiyama, C.、Taniguchi, M. 和 Germain, R.N.：“CD2 可以介导 TCR/CD3 独立的 T 细胞激活。”

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通讯作者：

MarusicーGalesic,S.,Saito,T.,Tentori,L.,ZunigaーPflucker,J.,Raulet,D.H.,Allison.J.P.&Kruisbeek,A.M.: "A novel gamma delta TCT adds limited diversity to the gamma delta repertoire in adult thymus." J.Immunol.142. 28 (1989)

Marusic-Galesic, S.、Saito, T.、Tentori, L.、Zuniga-Pflucker, J.、Raulet, D.H.、Allison.J.P. 和 Kruisbeek, A.M.：“一种新颖的 gamma delta TCT 为 gamma delta 库增加了有限的多样性在成人胸腺中。”J.Immunol.142. 28 (1989)