Elucidation of new pathophysiology of autoimmune pituitary diseases caused by a paraneoplastic syndrome

阐明副肿瘤综合征引起的自身免疫性垂体疾病的新病理生理学

基本信息

批准号：
22K16396
负责人：
蟹江慶太郎
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

自己免疫性下垂体炎には腫瘍随伴症候群として発症する一群があることを見出し、その発症に特異的キラーT細胞が関与することを明らかにしてきた。しかし、患者固有のHLAを持つヒト下垂体を疾患モデルとして再現できないことから、病態についての十分な解析はなされておらず、さらに液性免疫としての補体依存性あるいは抗体依存性の細胞傷害活性の病態への関与も明らかではない。自己免疫性下垂体炎の患者由来iPS細胞を用いたin vitro疾患モデルを構築し、細胞性免疫および液性免疫の病態への関与を明らかにすることを通じて、腫瘍随伴症候群としての自己免疫性下垂体炎の病態解明とともに新規治療のシーズ探索を目指す。本研究は、①患者iPS細胞から下垂体の作成、②患者由来PIT-1特異的キラーT細胞の単離および患者由来下垂体との共培養を用いたin vitroモデル作成、③下垂体と患者血清、末梢血単核球細胞(PBMC)を用いたCDC活性、ADCC活性の評価、④in vitroモデルにおける細胞傷害の抑制因子の探索、⑤胸腺腫データベースを用いた解析の5ステップで実施する。①iPS細胞からの下垂体分化誘導手法を用いて、患者および健常人のiPS細胞由来下垂体（iPSC下垂体）を作成した。また、抗原タンパクであるPIT-1の制御下にGFPレポーターを発現するiPS細胞を用いて標的細胞の収集効率を高めた。②患者PBMCに対し、全長PIT-1タンパクをカバーする10アミノ酸ごとのペプチドを作成し、個別に添加して活性化するキラーT細胞を分取した。予備実験により特異的ペプチドを同定し、特異的T細胞の活性化（CD137発現）、細胞傷害性（CD107a発現）を確認していた。現在、これら下垂体細胞とキラーT細胞を共培養したin vitroモデルの条件最適化を行っている。

它发现自身免疫性 - 免疫性核炎具有成群作为肿瘤can综合征的组，并揭示了发作是特定的杀伤细胞。但是，由于具有患者特异性HLA的垂体不能作为疾病模型再现，因此没有足够的病理分析，而作为液体免疫或抗体依赖性细胞活性。参与条件。通过使用自身免疫性垂体炎的患者衍生的IPS细胞建立体外疾病模型，以自我免疫性为肿瘤综合症，并阐明了细胞免疫和液体免疫的参与。垂体炎。这项研究是①从患者IPS细胞中创建垂体，（2）患者衍生的PIT-1特殊PIT-1特异性杀手T细胞，并与患者衍生的垂体cdc CDC活性和ADCC活性共同培养，并使用血清活性，外周血核细胞（PBMC），在体外模型中寻找抑制细胞，使用胸腺瘤数据库进行分析的5个步骤。（1）使用IPS细胞的垂体衍生物诱导方法创建了针对患者和健康人（IPSC垂体）的垂体（IPSC垂体）（IPSC垂体）。此外，使用IPS细胞增强了靶细胞的收集效率，该IPS细胞在抗原蛋白质PIT-1的控制下显示GFP报告基因。（2）为患者PBMC创建了覆盖总长度-1蛋白的每种10个氨基酸的肽，并且分布了单独激活的杀手T细胞。通过初步实验鉴定出特定的肽，并确认了特定T细胞（CD137表达）的激活（CD137表达）（CD107A表达）。当前，对这些垂体细胞和杀伤T细胞进行培养的体外模型的状况进行了优化。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Responsiveness to DDAVP in Cushing’s disease is associated with USP8 mutations through enhancing AVPR1B promoter activity

DOI：
10.1007/s11102-022-01220-4
发表时间：
2022-04
期刊：
Pituitary
影响因子：
3.8
作者：
Hiroki Shichi;H. Fukuoka;Maki Kanzawa;Masaaki Yamamoto;Naoki Yamamoto;Masaki Suzuki;Shin Urai;R. Matsumoto;Keitaro Kanie;Y. Fujita;H. Bando;G. Iguchi;N. Inoshita;S. Yamada;Yutaka Takahashi;Wataru Ogawa
通讯作者：
Hiroki Shichi;H. Fukuoka;Maki Kanzawa;Masaaki Yamamoto;Naoki Yamamoto;Masaki Suzuki;Shin Urai;R. Matsumoto;Keitaro Kanie;Y. Fujita;H. Bando;G. Iguchi;N. Inoshita;S. Yamada;Yutaka Takahashi;Wataru Ogawa

疾患iPS細胞を用いた自己免疫性下垂体疾患の in vitro疾患モデルの樹立

利用病变 iPS 细胞建立自身免疫性垂体疾病体外疾病模型