Notchの活性化変異による白血病発症機構の解析

Notch激活突变致白血病发生机制分析

• 批准号: 17013057
• 负责人: 松村 到
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17013057/
• 关键词: Notch; 造血幹細胞; 分化; 白血病

本研究ではNotchによる白血病の発症機構について解析を行った。マウスの造血幹/前駆(Lin^-Sca-1^+)細胞に4-hydroxytamoxifen(4-HT)によってNotch1活性が誘導されるNotch1/ERTを導入した。Notch1/ERT導入細胞は、4-HT非存在下ではサイトカイン存在下でも14日以上増殖できなかったのに対し、4-HT存在下では14日以上増殖を続けた。培養7日目では、4-HT存在下で培養したNotch1/ERT導入細胞は、4-HT非存在下の細胞と比較してc-myc,cyclin D2,D3,E,E2F1の発現が上昇していた。また、Notchシグナルが、c-mycプロモーターの-195bpから-161bpの部位にDNA結合蛋白を誘導し、同部位を活性化することが明らかとなった。次に、造血細胞に内因性に発現するNotchが赤/巨核球系細胞の分化に及ぼす影響について解析を行った。まず、OP9システムを用いて赤芽球分化過程でのNotch1の発現を検討したところ、Notch1の発現はc-Kit^+の幼弱細胞で認められたが、分化とともに低下し、正染性赤芽球では消失した。マウスのLin^-Sca-1^+細胞をNotchリガンドであるJagged1を発現した3T3細胞と共培養した場合、EPOやTPOによる赤芽球、巨核球系への分化が強く抑制され、Lin^-の未分化な細胞が増加した。この分化抑制機構として、Notchによって発現が誘導されるHES1がGATA-1と直接結合し、GATA-1とp300との結合を阻害し、その活性を抑制することが明らかとなった。以上より、Notchシグナルは細胞増殖を誘導するc-mycの発現を誘導すると共に、細胞分化に関わる転写因子の機能を抑制し白血病発症に関わると考えられた。

在本研究中，我们分析了Notch引起的白血病发生的机制。 Notch1/ERT 的 Notch1 活性由 4-羟基他莫昔芬 (4-HT) 诱导，被引入小鼠造血干/祖细胞 (Lin^-Sca-1^+) 细胞中。在没有 4-HT 的情况下，即使存在细胞因子，引入 Notch1/ERT 的细胞也不能增殖超过 14 天，而在存在 4-HT 的情况下，它们可以继续增殖超过 14 天。培养第 7 天，与不存在 4-HT 的细胞相比，在存在 4-HT 的情况下培养的导入 Notch1/ERT 的细胞 c-myc、细胞周期蛋白 D2、D3、E 和 E2F1 的表达增加。研究还表明，Notch 信号会诱导 DNA 结合蛋白到达 c-myc 启动子的 -195bp 至 -161bp 位点，并激活该位点。接下来，我们分析了造血细胞内源表达的Notch对红细胞/巨核细胞分化的影响。首先，我们利用OP9系统研究了成红细胞分化过程中Notch1的表达，发现在c-Kit^+未成熟细胞中观察到Notch1表达，但随着分化而减少，并且Notch1的表达随着分化而减少，导致正染色红细胞在母细胞中消失。当小鼠Lin^-Sca-1^+细胞与表达Notch配体Jagged1的3T3细胞共培养时，EPO和TPO诱导的成红细胞和巨核细胞的分化受到强烈抑制，而Lin^-未分化细胞的数量增加。作为抑制这种分化的机制，已揭示由Notch诱导表达的HES1直接与GATA-1结合，抑制GATA-1与p300之间的结合，并抑制其活性。基于上述，Notch信号被认为通过诱导c-myc的表达（其诱导细胞增殖）并抑制参与细胞分化的转录因子的功能而参与白血病的发展。

项目成果

Cell cycle regulation in hematopoietic stem/progenitor cells.

• DOI: 10.3923/jbs.2005.50.60
• 发表时间: 2004
• 期刊: Cell cycle
• 影响因子: 4.3
• 作者: S. Ezoe;I. Matsumura;Yusuke Satoh;Hirokazu Tanaka;Y. Kanakura