E2F-1のアポトーシス誘導分子、癌抑制遺伝子としての機能の解析

E2F-1作为凋亡诱导分子和抑癌基因的功能分析

• 批准号: 14026024
• 负责人: 松村 到
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026024/
• 关键词: 細胞周期; アポトーシス; 癌抑制遺伝子; E2F-1

細胞の増殖・分化は厳密な細胞周期制御のもとに行われる。また、近年、細胞周期制御は細胞の生存/死の制御においても極めて重要な役割を担うことが明らかにされてきた。最近、我々は、マウス線維芽細胞株NIH3T3細胞にE2F-1、c-Mycを過剰発現させると、E2F-1がNF-κBの機能を阻害し、血清除去によって誘導されるアポトーシスの感受性を高めることを見出した。本研究では、E2F-1、c-Mycによるアポトーシス誘導機構について更に詳細な解析を行い、以下の結果を見出した(Molecular Cell 9:1017-1029,2002)。1)E2F-1はDP-1との2量体化領域を介してNF-κBのサブユニットp65と結合し、NF-κBの2量体化(p65とp50の結合を阻害する)を阻害した。この機能はE2Fファミリー分子(E2F1-6)の中ではE2F-1に特異的であった。2)E2F-1がNIH3T3細胞の血清除去によるアポトーシス感受性を亢進させる際には、DNA結合領域とDP-1との2量体化領域のみが必要で、転写活性化領域は必要なかった。この結果から、E2F-1は転写因子としてNIH3T3細胞の血清除去によるアポトーシス感受性を高めるのではないと考えられた。3)E2F-1ノックアウトマウスの胎児線維芽細胞(MEF)を用いた解析から、過剰発現させたE2F-1のみでなく、内因性のE2F-1もNF-κBの機能を阻害することが明らかとなった。この作用は、細胞周期のうちでE2F-1がRbによって捕捉されているG1期には認められず、G1/S期に強く認められた。これらの実験結果から、増殖期にある細胞では、細胞周期のG1/S移行期を経る度に、E2F-1によってNF-κBの機能が阻害され、細胞のアポトーシス感受性が高まると考えられた。

细胞增殖和分化是在严格的细胞周期控制下发生的。此外，近年来，人们发现细胞周期控制在控制细胞存活/死亡方面也发挥着极其重要的作用。最近，我们在小鼠成纤维细胞系NIH3T3细胞中过表达E2F-1，c-Myc，发现E2F-1抑制NF-κB的功能并增加对血清撤药诱导的细胞凋亡的敏感性。在本研究中，我们对E2F-1和c-Myc的细胞凋亡诱导机制进行了更详细的分析，并发现了以下结果(Molecular Cell 9:1017-1029, 2002)。 1) E2F-1 通过与 DP-1 的二聚化区域与 NF-κB 亚基 p65 结合，并抑制 NF-κB 二聚化（抑制 p65 和 p50 的结合）。该功能是 E2F 家族分子 (E2F1-6) 中的 E2F-1 所特有的。 2)当E2F-1因血清撤除而增强NIH3T3细胞的凋亡敏感性时，只需要DNA结合区和与DP-1的二聚化区，而不需要转录激活区。由此结果认为，E2F-1不作为转录因子而增加NIH3T3细胞因血清撤除而引起的凋亡敏感性。 3)使用E2F-1敲除小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)进行的分析表明，不仅E2F-1过度表达，而且内源性E2F-1也抑制NF-κB功能。当 E2F-1 被 Rb 捕获时，在细胞周期的 G1 期未观察到这种效应，但在 G1/S 期则强烈观察到该效应。这些实验结果表明，在增殖期的细胞中，每次经过细胞周期的G1/S过渡期时，E2F-1都会抑制NF-κB功能并增加细胞凋亡的易感性。

项目成果

Ueda S, et al.: "Critical roles of c-kit tyrosine residues 567 and 719 in stem cell cell factor-induced chemotaxis : contribution of src family kinase and PI3-kinase on calcium mobilization and cell migration"Blood. 99・9. 3342-3349 (2002)

Ueda S 等人：“c-kit 酪氨酸残基 567 和 719 在干细胞细胞因子诱导的趋化作用中的关键作用：src 家族激酶和 PI3 激酶对钙动员和细胞迁移的贡献”Blood 99・9。 3342-3349 (2002)

Tanaka H, et al.: "E2F-1 and c-Myc potentiate apoptosis through inhibition NF-κB that facilitates MnSOD-mediated ROS elimination"Molecular Cell. 9・5. 1017-1029 (2002)

Tanaka H 等：“E2F-1 和 c-Myc 通过抑制 NF-κB 促进细胞凋亡，促进 MnSOD 介导的 ROS 消除”《分子细胞》9·5。

Mizuki M, et al.: "Suppression of myeloid transcription factors and induction of STAT response genes by AML-specific Flt3 mutations"Blood. (in press).

Mizuki M 等人：“通过 AML 特异性 Flt3 突变抑制骨髓转录因子并诱导 STAT 反应基因”Blood。

Ueda S, et al.: "Constiutive activation of c-kit by the juxtamembrane but not the catalytic domain mutations is inhibited selectively by tyrosine kinase inhibitors STI571 and AG1296"Int. J. Hematol. 76・5. 427-435 (2002)

Ueda S 等人：“酪氨酸激酶抑制剂 STI571 和 AG1296 选择性地抑制近膜突变对 c-kit 的激活”，Int. J. 427-435 (2002)。

Matsumura I, et al.: "Roles for E2F1 and c-Myc in the regulation of cell growth and apoptosis"Cell Cycle. (in press).

Matsumura I 等人：“E2F1 和 c-Myc 在细胞生长和凋亡调节中的作用”细胞周期。