Syntaxin18複合体:膜輸送とシグナル伝達のインターフェイス

Syntaxin18 复合体：膜运输和信号转导的界面

基本信息

批准号：
16048229
负责人：
多賀谷光男
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16048229/
关键词：
小胞体膜融合 SNARE syntaxin18 よりあわせコイル

项目摘要

NSF-α-sNAP-sNARE複合体は、小胞輸送や神経伝達物質の開口放出において小胞とターゲット膜の融合に関わるタンパク質複合体である。NSFはシャペロン様ATPaseであり、α-SNAPはNSFを膜内在性タンパク質であるSNARE (SNAP receptorの略で、syntaxin、SNAP-25、VAMP-2などのサブユニットから成る)に結合させるアダプターである。我々は以前、小胞体に存在するsyntaxin18を発見し、このタンパク質がZW10、RINT-1(Rad50結合タンパク質)、p31、BNIP1などと結合していることを明らかにしている。これらの知見を基に本年度は以下の成果を得た。1)タンパク質間相互作用の解析i)RINT-1とZW10は直接結合し、その結合には互いのN末端領域が関与している。ii)p31のN末端19アミノ酸がRINT-1/ZW10との結合に関与する。ただし、RINT-1/ZW10とp31の結合は直接的ではない可能性がある。iii)p31はC末端部分によりあわせコイル構造とそれに引き続く膜貫通領域(TMD)(いわゆるSNAREモチーフ)を有し、syntaxin18と直接結合する。一般にSNARE間の結合はこのモチーフを介して行われるが、p31の場合はこのよりあわせコイル構造以外の領域もsyntaxin18との結合には必要である。2)各サブユニットの大量発現系の構築シャペロンと共発現させることによって活性を保持した状態でp31ΔTMDを大腸菌内で発現させることに成功した。現在、他のサブユニットの発現系の構築を進めている。

NSF-α-sNAP-sNARE 复合物是一种蛋白质复合物，参与囊泡运输和神经递质胞吐作用中囊泡和靶膜的融合。 NSF是一种类似分子伴侣的ATP酶，α-SNAP是将NSF与整合膜蛋白SNARE（SNAP受体的缩写，由突触蛋白、SNAP-25和VAMP-2等亚基组成）结合的接头。我们之前发现了存在于内质网中的syntaxin18，并揭示该蛋白与ZW10、RINT-1（Rad50结合蛋白）、p31、BNIP1等结合。基于这些发现，我们今年获得了以下结果。 1) 蛋白质-蛋白质相互作用的分析 i) RINT-1 和 ZW10 直接结合，并且它们的 N 末端区域参与这种结合。 ii) p31 的 N 端 19 个氨基酸参与与 RINT-1/ZW10 的结合。然而，RINT-1/ZW10 和 p31 之间的结合可能不是直接的。 iii) p31 在其 C 末端有一个扭曲的线圈结构，后跟一个跨膜结构域 (TMD)（所谓的 SNARE 基序），并直接与 Syntaxin18 结合。一般来说，SNARE 之间的结合是通过该基序发生的，但就 p31 而言，除了这种扭曲的线圈结构之外的区域也需要与突触蛋白 18 结合。 2）构建每个亚基的大规模表达系统我们成功地在大肠杆菌中表达p31ΔTMD，同时通过与分子伴侣共表达来保持其活性。我们目前正在构建其他亚基的表达系统。