神経細胞産生を調節する神経細胞と非神経細胞間のクロストーク

神经元和非神经元之间调节神经元产生的串扰

基本信息

批准号：
16047218
负责人：
玉巻伸章
金额：
$ 4.74万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

神経発生の分野では、グリアが神経細胞を生み出すというストーリーが流布されている。この様なジレンマを回避するためには、形態、細胞分裂能、発現遺伝子から、非神経細胞をグリアと未分化細胞に区別することが必要である。そこで我々は、マウス胎生後期及び生後のGABA神経前駆細胞を、胎生初期にウイルス注入するかGAD67-GFP knock-in mouseを利用して可視化した。脳室下帯のGABA神経前駆細胞は、胎生後期には幼若なGABA神経細胞と同様の形態をしているが、Ki-67陽性で増殖を繰り返す。同細胞は、生後に複雑な突起を生じ、グリア用の形態になる。このようなGABA神経前駆細胞が、組織中ではどのような遺伝子を発現しているかを知るには、単一細胞で発現するmRNAを検出する必要性がある。我々は、胎生後期のGAD67-GFP mouse脳室下帯を切り出し、トリプシン処理による細胞分散後、蛍光顕微鏡下でGFP蛍光を発する単一細胞を分取した。その後直ちに逆軽写、nested-PCRによりsingle cell RT-PCRを行った。その結果、GAD67,MAP2,Tuj1などの神経細胞マーカーとKi-67細胞増殖マーカーは共存することが明らかとなった。さらに他の多くの遺伝子発現も同時に確認する目的で、単一GABA神経前駆細胞のmRNAを増幅し、cDNA array analysisを行った。

在神经出现的领域，故事传播，其中gria产生神经细胞。为了避免这种困境，有必要将非北神经细胞与形式，细胞分裂和表达基因与非细胞细胞区分开。因此，在早期胎儿寿命中，我们使用病毒或GAD67-GFP敲击小鼠在胎儿生命的早期生命中可视化病毒或GAD67-GFP敲入小鼠。脑室下方的GABA神经容易发生的锈细胞具有与胎儿后半部分的年轻GABA神经细胞相同的形式，但在KI-67阳性中反复增殖。细胞在出生后引起复杂的突起，并形成玻璃的形式。有必要检测在单个细胞中表达的mRNA，以了解组织中哪种基因。我们在晚期胎儿寿命下切除了大脑室下方的GAD67-GFP小鼠，并在通过胰蛋白酶处理的细胞分散剂后，在荧光显微镜下发出GFP荧光的单个细胞。立即倒置，通过嵌套-PCR进行单细胞RT-PCR。结果，神经细胞标记（例如GAD67，MAP2，TUJ1和KI-67细胞增殖标记）共存。此外，将单个GABA神经细胞的mRNA放大了mRNA，并为同时确认许多其他基因表达的目的进行了cDNA阵列分析。

项目成果

期刊论文数量（22）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Dorsally derived netrin 1 provides an inhibitory cue and elaborates the ; waiting period' for primary sensory axons

背侧衍生的 netrin 1 提供抑制信号并详细阐述；

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Development 133
影响因子：
0
作者：
Nakamura K;Yamashita Y;Tamamaki N;Katoh H;Kaneko T;Negishi M;Watanabe et al.
通讯作者：
Watanabe et al.

Origin of the neocortical subependymal cells speculated by Emx1 and GAD67 expression.

DOI：
10.1093/chemse/bjh139
发表时间：
2005
期刊：
Chemical senses
影响因子：
3.5
作者：
N. Tamamaki
通讯作者：
N. Tamamaki

Mechanisms of neuropeptide Y, peptide YY, and pancreatic polypeptide inhibition of identified green fluorescent

神经肽 Y、肽 YY 和胰多肽抑制已识别绿色荧光的机制

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
J Neurosci. 25
影响因子：
0
作者：
Nakamura K;Yamashita Y;Tamamaki N;Katoh H;Kaneko T;Negishi M;Watanabe et al.;Wu et al.;Kiichi Watanabe;Osada et al.;Hanako Ikeda;Mami Matsuo-Tahasaki;Acuna-Goycolea et al.
通讯作者：
Acuna-Goycolea et al.

Pyramidal neurons of upper cortical layers generated by NEX-positive progenitor cells in the subventricular zone.

DOI：
10.1073/pnas.0508560102
发表时间：
2005-11
期刊：
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
影响因子：
11.1
作者：
Sheng-Xi Wu;S. Goebbels;KouichiC . Nakamura;K. Nakamura;Kouhei Kometani;N. Minato;T. Kaneko;K. Nave;N. Tamamaki
通讯作者：
Sheng-Xi Wu;S. Goebbels;KouichiC . Nakamura;K. Nakamura;Kouhei Kometani;N. Minato;T. Kaneko;K. Nave;N. Tamamaki

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发表时间：
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Watanabe;S.;Blaisdell;A.;Huber;L.;Young;A.(編集);Tanahira C;I de Y;Kaneko K;Yamamoto E;Huang J;Basu K;Esumi S;Eiichiro Yamamoto;Basu K.;Esumi S.;Higo S.;Higo S.;Huang J.;玉巻伸章;玉巻伸章
通讯作者：
玉巻伸章