ヒトES細胞からの脂肪血管前駆細胞の同定と脂肪細胞機能異常の発生細胞学的解析

人 ES 细胞中脂肪血管祖细胞的鉴定以及脂肪细胞功能障碍的发育细胞学分析

基本信息

批准号：
16046212
负责人：
伊藤裕
金额：
$ 4.99万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16046212/
关键词：
ES細胞前駆細胞発生分化形質変換マイクロアレイ

项目摘要

脂肪細胞の肥大増殖に伴う形質転換のプロセスの理解において脂肪細胞の起源発生分化の正確な把握が不可欠である。無限の増殖能と全能性を有するES細胞は、細胞分化解析の好適のマテリアルである。我々は、VEGF受容体の一つであるFlk1陽性細胞を純化し、Flk1陽性細胞が血管前駆細胞(ES cell-derived vascular progenitor cells ; ES-VPC)であることを発見した。更に我々は、日本初のヒトES細胞を用いた研究を開始した。本研究課題はヒトES細胞由来間葉系前駆細胞、更に脂肪血管前駆細胞を同定し、脂肪細胞の発生分化をin vitroで単一細胞レベルでトレースし脂肪細胞分化因子を網羅的に探索するとともに、その成果をメタボリックシンドロームの成因解明及び脂肪細胞機能是正治療法への応用を目指すものである。我々は、ヒトES細胞を用い、TRA-1-VEGFR-2+PDGFR+VEカドヘリン-分画が血管前駆細胞(hES-VPC)であることを明らかにした。hES-VPCに対してインスリン、デキサメサゾン、IBMX、ピオグリタゾンを用いた脂肪細胞分化を行っても脂肪細胞への分化は認められなかったが、コラーゲンIV上hES-VPCを低血清、PDGF-BB刺激下で30日間培養した細胞では、ある程度脂肪滴を有した細胞に分化した。またこの細胞群に骨分化刺激を行ったところ、アルシアンブルー陽性細胞の出現が認められた。この細胞の約70%では間葉系細胞マーカーであるCD90等が陽性であった。またこれら未分化hES、hES-VPC、およびhES-VPCより分化させた内皮細胞、血管平滑筋細胞よりmRNAを回収し、アフィメトリックス社のジーンチップを用い、マイクロアレイ解析を行った。その結果、hES-VPCの遺伝子発現は最近報告されたhES由来間葉系前駆細胞のそれとの間にある程度の相同性が認められた。

在理解与脂肪细胞肥厚性生长相关的转化过程时，对脂肪细胞的起源生成分化的准确理解至关重要。具有无限增殖潜力和质基因的ES细胞是用于细胞分析分析的合适材料。我们纯化了FLK1阳性细胞，其中一种VEGF受体，发现FLK1阳性细胞是ES细胞衍生的血管祖细胞（ES-VPC）。此外，我们已经开始使用人类ES细胞进行日本的首次研究。该研究主题是鉴定人类ES细胞衍生的间充质祖细胞和脂肪祖细胞，在体外追踪单细胞水平上脂肪细胞的发育分化，全面地搜索脂肪细胞分化因子，并阐明了代谢综合征的起源并应用结果并将结果应用于治疗结果。我们使用人类ES细胞揭示了Tra-1-VEGFR-2+PDGFR+VE钙粘蛋白 - 弗拉特裂缝是一种血管祖细胞（HES-VPC）。尽管未观察到使用胰岛素，地塞米松，IBMX和吡格列酮的脂肪细胞分化，但未观察到HES-VPC的脂肪细胞，但未观察到脂肪细胞分化，但在低血清和PDGF-BB刺激下用胶原蛋白IV中的HES-VPC培养的细胞在30天内与某些唇脂滴相分化为细胞。此外，当该细胞组刺激骨分化时，观察到Alcian蓝色阳性细胞的出现。这些细胞中约有70％的CD90是间充质细胞标记的阳性。此外，从内皮细胞和与这些未分化的HES，HES-VPC区分开的血管平滑肌细胞中收集mRNA，并使用辅助学中的基因芯片进行了微阵列分析。结果，与最近报道的HES衍生间充质祖细胞的Hes-VPC基因表达观察到了一些同源性。