スピンドルチェックポイントに関連したタンパク質複合体Nuf2-Heclの機能解析

纺锤体检查点相关蛋白复合物 Nuf2-Hecl 的功能分析

基本信息

批准号：
16026245
负责人：
深川竜郎
金额：
$ 2.37万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞周期の過程において、安定に染色体が娘細胞へ分配されることは、生物にとって最も基本的かつ重要な性質である。染色体の不安定性を防ぐために、細胞は様々なチェックポイント制御機構を備えており、スピンドルチェックポイント機構は、M期進行において中心的な役割を担っている。我々は保存されたセントロメアタンパク質Nuf2に注目して、Nuf2がHec1と複合体を形成して、M期でスピンドルチェックポイントタンパク質Mad2と結合することを明らかにしてきた(J.Cell Sci., 2003)。昨年度までの研究において、Nuf2-Hec1複合体の機能解析とNuf2複合体と結合するタンパク質群の探索を行い、Hec1は、構成的セントロメアタンパク質であるCENP-Hと相互作用することが明らかになった。本年度は、iFRAP法を用いてHec1の安定性を調べた結果、Hec1はG2のセントロメアでは、ダイナミックな挙動をとるが、M期のセントロメアでは、安定した構造をとって、Mad2複合体と相互作用することが明らかになった。このことより、Nuf2-Hec1複合体は、チェックポイントタンパク質と構成的セントロメアタンパク質を結びつける働きを行っていることが示唆された(Mol.Cell.Biol., 2005)。また、プロテオミクスを用いた多様な解析からNuf2-Hec1複合体が、CENP-Hの他にMis12複合体という他のセントロメアタンパク質や、ダイニンのサブユニットとも結合していることが明らかになった。今後は、Nuf2-Hec1複合体のタンパク質として機能あるいは活性の解明が、セントロメアにおけるスピンドルチェックポイント機構制御の解明につながると思われる。

在细胞周期中染色体向子细胞的稳定分布是生物体最基本和最重要的特性。为了防止染色体不稳定，细胞配备了各种检查点控制机制，其中纺锤体检查点机制在M期进展中起着核心作用。我们关注保守的着丝粒蛋白 Nuf2，发现 Nuf2 与 Hec1 形成复合物，并在 M 期与纺锤体检查点蛋白 Mad2 结合（J.Cell Sci.，2003）。在去年之前的研究中，我们分析了Nuf2-Hec1复合物的功能，并寻找了一组与Nuf2复合物结合的蛋白质，结果发现Hec1与组成性着丝粒蛋白CENP-H相互作用。今年，我们使用 iFRAP 方法研究了 Hec1 的稳定性，发现 Hec1 在 G2 着丝粒处具有动态行为，但在 M 期着丝粒处它采用稳定的结构并与 Mad2 复合体相互作用。这表明 Nuf2-Hec1 复合物具有连接检查点蛋白和组成性着丝粒蛋白的功能（Mol.Cell.Biol.，2005）。此外，使用蛋白质组学进行的各种分析表明，Nuf2-Hec1 复合物与 CENP-H（另一种称为 Mis12 复合物的着丝粒蛋白）和动力蛋白亚基结合。将来，阐明 Nuf2-Hec1 复合物作为蛋白质的功能或活性可能会阐明着丝粒纺锤体检查点机制的控制。

项目成果

期刊论文数量（17）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

高等脊椎動物のセントロメア構築と機能発現

高等脊椎动物着丝粒的构建和功能表达

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
医学のあゆみ 208
影响因子：
0
作者：
Gerhard;D.S.;113 authors;Koichi Kawakami;深川竜郎
通讯作者：
深川竜郎

Dicer is essential for formetion of the heterochromatin structure in vertebrate cells.

Dicer 对于脊椎动物细胞中异染色质结构的形成至关重要。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Nature Cell Biology 6
影响因子：
0
作者：
Miskey;C.;Lzsvak;Z.;Kawakami;K.;Ivics;Z.;Tatsuo Fukagawa
通讯作者：
Tatsuo Fukagawa

The human Mis12 complex is required for kinetochore assembly and proper chromosome segregation.

DOI：
10.1083/jcb.200509158
发表时间：
2006-04-10
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
0
作者：
Kline SL;Cheeseman IM;Hori T;Fukagawa T;Desai A
通讯作者：
Desai A

「細胞核のダイナミクス」:高等脊椎動物のセントロメアタンパク質の集合と機能発現

《细胞核动力学》：高等脊椎动物着丝粒蛋白的组装和功能表达

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
0
作者：
Gerhard;D.S.;113 authors;Koichi Kawakami;深川竜郎;深川竜郎
通讯作者：
深川竜郎

CENP-A depletion leads to impaired mitotic checkpoint maintenace in vertebrate cells.

CENP-A 缺失会导致脊椎动物细胞中的有丝分裂检查点维持受损。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Molecular and Cellular Biology 25
影响因子：
0
作者：
Mikami;Y.;Hori;T.;Kimura;H.;Fukagawa;T.;Atsushi Yamauchi;Yukinori Minoshima;Vinciane Regnier
通讯作者：
Vinciane Regnier