HIV-1コレセプターの特殊立体構造に対する分子認識自己抗体誘導によるエイズ制御

通过诱导针对HIV-1辅助受体特殊三维结构的分子识别自身抗体来控制艾滋病

基本信息

批准号：
16017287
负责人：
庄司省三
金额：
$ 6.53万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017287/
关键词：
HIV-1 ワクチン CCR5 自己抗体コレセプター

项目摘要

HIV-1のコレセプター(CCR5,CXCR4)の第2細胞外ドメインの一部を構成するアーチ状の特殊立体構造(UPA, Undecapeptidyl Arch)を環状ドデカペプチドとして再構築し、CCR5をミミツクした抗原cDDR5-MAPを調製した。マウスにこの抗原を免疫すると、この抗原に対して立体特異的抗体を産生し、CCR5に特異的に結合し、さらに強い抗HIV活性を示した。さらに、得られた抗体は臨床分離株のR5及びX4ウイルス(clade A, C, E)の感染をもそれぞれに強く阻害した。また、cDDR5-MAPをカニクイサルに免疫したのち、SHIV_<SF162P3>をchallengeし、本ワクチンのウイルス感染防止効果を調べた。まず初めに、SHIV_<SF162P3>をカニクイサルのPBMCで拡張・適合化を行い、challengeウイルスを調製した。カニクイサル6頭(♂)のうち、3頭にcDDR5-MAP(300μg inフロインドの完全アジュバンド200μL/1頭)を0及び1週目に腹腔に投与し、基礎免疫を行い、6週目に、同抗原(300μg inフロインドの不完全アジュバンド200μL/1頭)を皮下に注射して、追加免疫をした。免疫後、2週毎に、採血し抗体価をBIA-core法及びELISA法により測定した。追加免疫より5週目に、SHIV_<SF162P3>(10TCID_<50>)を静注して、challengeした。その後、0,1,3,4,6,10週目に採血し、Viral Load、抗体価、CD4及びCD8数を測定した。1週目の免疫群のViral Loadはコントロール群、数十億コピーに比べ、数百万コピーに低下し、強い感染防止効果が認められた。高い抗体価が追加免疫時から認められ、ウイルスchallengeから10週目(初回免疫より21週目)まで、維持されていた。

构成HIV-1 cocector的第二个细胞外结构域（CCR5，CXCR4）的拱形特殊3D结构（UPA，UPA，未蛋白肽拱），作为环状十二肽重建，以准备使用CCR5的抗原CDDRDR5-MAP。用这种抗原对小鼠的免疫产生了针对该抗原的立体特异性抗体，特别是与CCR5结合，并表现出更强的抗HIV活性。此外，所产生的抗体还强烈抑制了临床分离株R5和X4病毒（进化枝A，C，E）的感染。此外，在将CDDR5-MAP免疫到蟹口猴之后，SHIV_ <sf162p3>受到挑战，以研究该疫苗预防病毒感染的有效性。首先，SHIV_ <sf162p3>被扩展并与螃蟹嘴猴的PBMC进行扩展，以准备挑战病毒。 Of the six male crab-mouth monkeys, three were administered cDDR5-MAP (200 μL of 300 μg in Freund's complete adjuvant/1 head) into the peritoneal cavity at 0 and 1 week, and basal immunity was performed, and at 6 weeks, the antigen (200 μL of incomplete adjuvant/1 head) was injected subcutaneously to boost the immune system.免疫后，每两周收集一次血液，并通过BIA核和ELISA方法测量抗体滴度。助推器后5周，SHIV_ <SF162P3>（10TCID_ <50>）被静脉注射并挑战。之后，在第0、1、3、4、6和10周收集血液，并测量病毒载量，抗体滴度，CD4和CD8计数。与对照组相比，病毒负荷是第一周的免疫组，将其减少到数百万的副本，并被发现具有强烈的感染预防作用。在增强剂免疫期间观察到高抗体滴度，并在病毒挑战的第10周（初次免疫后第21周）维持。