HIV-1コレセプターの特殊立体構造に対する分子認識自己抗体誘導によるエイズ制御

通过诱导针对HIV-1辅助受体特殊三维结构的分子识别自身抗体来控制艾滋病

基本信息

批准号：
16017287
负责人：
庄司省三
金额：
$ 6.53万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017287/
关键词：
HIV-1 ワクチン CCR5 自己抗体コレセプター

项目摘要

HIV-1のコレセプター(CCR5,CXCR4)の第2細胞外ドメインの一部を構成するアーチ状の特殊立体構造(UPA, Undecapeptidyl Arch)を環状ドデカペプチドとして再構築し、CCR5をミミツクした抗原cDDR5-MAPを調製した。マウスにこの抗原を免疫すると、この抗原に対して立体特異的抗体を産生し、CCR5に特異的に結合し、さらに強い抗HIV活性を示した。さらに、得られた抗体は臨床分離株のR5及びX4ウイルス(clade A, C, E)の感染をもそれぞれに強く阻害した。また、cDDR5-MAPをカニクイサルに免疫したのち、SHIV_<SF162P3>をchallengeし、本ワクチンのウイルス感染防止効果を調べた。まず初めに、SHIV_<SF162P3>をカニクイサルのPBMCで拡張・適合化を行い、challengeウイルスを調製した。カニクイサル6頭(♂)のうち、3頭にcDDR5-MAP(300μg inフロインドの完全アジュバンド200μL/1頭)を0及び1週目に腹腔に投与し、基礎免疫を行い、6週目に、同抗原(300μg inフロインドの不完全アジュバンド200μL/1頭)を皮下に注射して、追加免疫をした。免疫後、2週毎に、採血し抗体価をBIA-core法及びELISA法により測定した。追加免疫より5週目に、SHIV_<SF162P3>(10TCID_<50>)を静注して、challengeした。その後、0,1,3,4,6,10週目に採血し、Viral Load、抗体価、CD4及びCD8数を測定した。1週目の免疫群のViral Loadはコントロール群、数十億コピーに比べ、数百万コピーに低下し、強い感染防止効果が認められた。高い抗体価が追加免疫時から認められ、ウイルスchallengeから10週目(初回免疫より21週目)まで、維持されていた。

cDDR5是通过将构成HIV-1辅助受体（CCR5、CXCR4）的第二胞外结构域的一部分的弓形特殊三级结构（UPA，Undecapeptidyl Arch）重建为环状十二肽-MAP而制备的模拟CCR5的抗原。当小鼠用这种抗原免疫时，它们会产生针对这种抗原的立体特异性抗体，这种抗体特异性地与 CCR5 结合，表现出更强的抗 HIV 活性。此外，获得的抗体分别强烈抑制临床分离的R5和X4病毒（进化枝A、C和E）的感染。此外，在用 cDDR5-MAP 免疫食蟹猴后，我们对 SHIV_<SF162P3> 进行了攻击，以检查该疫苗预防病毒感染的有效性。首先，通过使用食蟹猴PBMC扩展和改造SHIV_<SF162P3>来制备攻击病毒。 6只雄性食蟹猴中的3只在第0周和第1周腹腔注射cDDR5-MAP（弗氏完全佐剂300μg，200μL/头）进行基础免疫，第6周时，腹腔注射相同的抗原（弗氏不完全佐剂300μg），200μL/头）皮下注射进行加强免疫。免疫后每两周采血，采用BIA-core法和ELISA法测定抗体滴度。加强免疫后五周，静脉注射SHIV_<SF162P3>(10TCID_<50>)进行攻击。此后，在第0、1、3、4、6和10周时采集血液，并测量病毒载量、抗体滴度以及CD4和CD8计数。与对照组的数十亿拷贝相比，免疫组在第1周的病毒载量减少至数百万拷贝，表明具有很强的感染预防作用。从加强免疫时起就观察到高抗体滴度，并维持到病毒攻击后10周（第一次免疫后21周）。