成長円錐のプロテオミクスに基づく新規軸索ガイダンス分子受容体の発見

基于生长锥蛋白质组学发现新型轴突引导分子受体

基本信息

批准号：
16015240
负责人：
五十嵐道弘
金额：
$ 3.78万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

成長円錐の900種類の同定蛋白質のうち、受容体と思われる蛋白質を分類した。この中には、軸索ガイダンス分子受容体(plexin, Eph receptor)、ニューロトロフィン受容体、伝達物質受容体(GABA-A受容体;グルタミン酸受容体)、LDL受容体、シナプス安定化受容体(neurexin, latrophilin)などが主であったが、このほかにリガンド未知の受容体が10種類以上存在した。これのモティーフを解析し、そのリガンドと細胞内結合因子(情報伝達分子)を検索した。まず、受容体候補物質M6aの結合蛋白質を293細胞発現によるdual-tag法で解析したところ、10種類以上の蛋白質が結合した。これらを同定し、そのうち2種類の膜結合性蛋白質(SNAREモティーフを有するもの、およびleucine-rich repeatを有するもの)について、結合が本当に神経細胞内で生じているかを検討した。また受容体は糖蛋白質であることが多いため、細胞内で貯留しやすく、本来の結合蛋白質以外の細胞内因子と結合する可能性のあることがわかった。そこで、効率的なスクリーニングのために、糖鎖をはずしたM6aを発現して相互作用を解析する方法を検討した。またリガンドの検索については、Nogo receptor(NgR)のホモログであるNgR2に結合する蛋白質を生化学的に同定し、これがミエリン由来の軸索再生阻害蛋白質であることを見出した。この受容体は、NgRのリガンドとして知られる分子とは異なった親和性を示すことが明らかとなった。

在生长锥中已识别的 900 种蛋白质中，我们对被认为是受体的蛋白质进行了分类。其中包括轴突导向分子受体（plexins、Eph受体）、神经营养蛋白受体、递质受体（GABA-A受体；谷氨酸受体）、LDL受体、突触稳定受体（神经素、latrophilin）等，但也有以上多种。配体未知的其他 10 种受体。我们分析了该基序并寻找其配体和细胞内结合因子（信息传递分子）。首先，我们利用在293细胞中表达的双标签方法分析了受体候选物质M6a的结合蛋白，发现结合了10种以上的蛋白。我们鉴定了这些蛋白，并研究了两种类型的膜结合蛋白（一种具有 SNARE 基序，一种具有富含亮氨酸重复序列）的结合是否确实发生在神经元内。此外，由于受体通常是糖蛋白，因此它们倾向于在细胞内积累，并且有可能结合其原始结合蛋白以外的细胞内因子。因此，为了有效筛选，我们研究了一种在没有糖链的情况下表达 M6a 并分析相互作用的方法。关于配体的寻找，我们通过生化鉴定了一种与Nogo受体（NgR）同源物NgR2结合的蛋白质，并发现这是一种髓鞘来源的轴突再生抑制蛋白。人们发现该受体对已知为 NgR 配体的分子具有不同的亲和力。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Role of Ser50 phosphorylation in SCG10 regulation of microtubule depolymerization

DOI：
10.1002/jnr.20462
发表时间：
2005-05
期刊：
Journal of Neuroscience Research
影响因子：
4.2
作者：
T. Togano;M. Kurachi;Michitoshi Watanabe;G. Grenningloh;M. Igarashi
通讯作者：
T. Togano;M. Kurachi;Michitoshi Watanabe;G. Grenningloh;M. Igarashi

Only a small subset of the horizontally transferred chromosomal genes in Escherichia coli are translated into proteins.

大肠杆菌中水平转移的染色体基因中只有一小部分被翻译成蛋白质。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Mol Cell Proteomics. 3(8)
影响因子：
0
作者：
Igarashi M;Sato M;五十嵐道弘;Taoka M et al.(他5名)
通讯作者：
Taoka M et al.(他5名)

Glia-derived inhibitors of axonal regrowth

神经胶质细胞衍生的轴突再生抑制剂

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Acta Medica Biologica (印刷中)
影响因子：
0
作者：
Igarashi M;Sato M
通讯作者：
Sato M

シナプス終末形成の機構

突触末端形成机制

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
蛋白質核酸酵素 49(3)
影响因子：
0
作者：
A.Imiya;K.Tatara;H.Ootani;V.Hlavac;五十嵐道弘
通讯作者：
五十嵐道弘

ブレインサイエンスレビュー2004(伊藤正男, 川合述史編)

脑科学评论 2004（伊藤正雄、河合正司编辑）

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
0
作者：
五十嵐道弘
通讯作者：
五十嵐道弘

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五十嵐道弘其他文献

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DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
長井広樹;中嶋悠一朗;五十嵐道弘
通讯作者：
五十嵐道弘

Design and Synthesis of DNA Alkylationg Natural Products : A Chemo-enzymatic Approach

DNA 烷基化天然产物的设计与合成: 化学酶法

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
Masayuki Itoh;Mariko Yamashita;Masaki Kaneko;Hiroyuki Okuno;Manabu Abe;Maya Yamazaki;Rie Natsume;Daisuke Yamada;Toshie Kaizuka;Reiko Suwa;Kenji Sakimura;Masayuki Sekiguchi;Keiji Wada;Mikio Hoshino;Masayoshi Mishina;Takashi Hayashi;鈴木勉;五十嵐道弘;Hiroki Oguri
通讯作者：
Hiroki Oguri