薬物治療の最適化に叶う粘膜ワクチン戦略の創出

创建粘膜疫苗策略以优化药物治疗

• 批准号: 14021058
• 负责人: 堤 康央
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021058/
• 关键词: 膜融合リポソーム; 粘膜ワクチン; アジュバント; HVJ; DDS; ナノテクノロジー; 膜融合リポソーム; 粘膜ワクチン; アジュバント; HVJ; DDS; ナノテクノロジー

申請者は今年度も含め、膜融合リポソーム(FL)【センダイウイルス(HVJ)の細胞膜付着・融合能のみを付与したリポソーム】の細胞質内物質導入ベクターとしての有用性・安全性を評価してきた。その結果、FLは殆ど全ての細胞に対して、細胞傷害性を示すことなく、リポソーム内に封入可能であれば、分子(抗原蛋白質・遺伝子)・粒子(機能性ナノ粒子)といった形状や物理化学的性質と無関係に、如何なる物をも効率よく細胞質内へ一挙かつ直接導入出来ることを見出した。即ちFLは、(1)細胞内への物質導入に非効率なエンドサイトーシス経路を介する従来までの細胞内物質導入キャリアよりも物質導入効率や安全性の点ではるかに優れている、(2)粘膜感染するHVJを使用しているため、粘膜付着性を有する、(3)HVJは元々ヒトに対して病原性を示さないうえ、事前に紫外線照射等によりゲノムRNA遺伝子を完全に断片化しておくため、ウイルスベクターとは異なり安全性が保証されている、(4)内封物に高い生体内安定性を付与できるといった、粘膜ワクチン用の抗原デリバリー型アジュバントとして好都合な特性を有することを明らかとした。以上の基盤的研究成果をもとに、粘膜ワクチン用の抗原デリバリー型新規アジュバントとしてのFLの有用性をさらに評価した結果、FLを適用することで鼻腔リンパ組織に存在するM細胞、鼻腔上皮細胞、Mac-1陽性細胞へ効率よく抗原送達できることが確認された。またFLは、粘膜上皮細胞のMHCクラスII分子の発現を増強するなど、アジュバント活性をも併せ持つを明らかとした。これらの結果を反映し、FLを用いて抗原蛋白質を経鼻免疫することで、投与粘膜面・全身において強い抗原特異的抗体・細胞障害性T細胞が誘導できた。また遠隔の粘膜面である糞便中にも抗原特異的IgAが検出された。以上の成果・知見をもとに、現在さらに詳細な検討を進めている。

除今年外，申请人还将膜融合脂质体（FL）[仅具有粘附能力和sendai病毒病毒（HVJ）融合细胞的脂质体的效用和安全性评估为胞内物质物质转移载体。结果，发现FL可以有效直接将任何物质直接引入细胞质中，而与分子（抗原蛋白，基因），颗粒（功能性纳米颗粒）的形状和物理化学特性无关，任何物质都可以有效地引入细胞质毒性，而无需表现出cytototototototic，并且任何物质都可以有效地引入细胞质。 In other words, FL has been shown to have advantageous properties as an antigen delivery adjuvant for mucosal vaccines, such as (1) being far superior to conventional intracellular substance-introducing carriers via endocytosis pathways, which are inefficient for introducing substances into cells, (2) having mucosal adhesion because HVJ uses mucosal infecting HVJ, (3) HVJ is not originally pathogenic to与病毒载体不同，人类，并且由于基因组RNA基因被紫外线照射等完全碎片，因此可以保证安全性，并且（4）它可以赋予内密封的体内稳定性高。根据上述基础研究结果，我们进一步评估了FL作为粘膜疫苗的新型抗原递送辅助剂的实用性，并确认施用FL允许在鼻膜淋巴结组织中存在有效的抗原递送到M细胞，鼻皮细胞和MAC-1阳性细胞。还表明，FL还具有辅助活性，增强了MHC II类分子在粘膜上皮细胞中的表达。反映这些结果，通过使用FL的抗原蛋白进行鼻腔免疫，在粘膜表面和全身中诱导了强抗原特异性抗体和细胞毒性T细胞。在毛孔表面的粪便中也检测到抗原特异性IgA。根据上述结果和发现，我们目前正在进行进一步的详细考虑。