チャネル病の作業仮説に基づく大量高速処理法によるてんかんの責任遺伝子の検索

基于通道疾病的工作假设，使用大容量高速处理方法寻找导致癫痫的基因

• 批准号: 13035049
• 负责人: 廣瀬 伸一
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13035049/
• 关键词: 遺伝学; ゲノム; 神経科学; 脳神経; 脳神経疾患; てんかん; チャネル病; 組換え動物; 熱性けいれん; ADNFLE; BFNC; GEFS+

中枢神経発現イオンチャネルに当てる研究法により、遺伝子バンクより前年度に引き続き、以下の発見を行った。(1)広汎性てんかん熱性けいれんプラスII型で脳内Na^+チャネルSCN1Aの新規遺伝子異常2つを発見した。(2)日本人の優性遺伝てんかん熱性けいれんプラスの発症に、世界に先駆け、Na^+チャネルSCN2A遺伝子が関与していることを発見した。この変異はNa^+チャネルのinactivationを遅延させ、Na^+イオンの流入が増すことを示した。これは、変異により、Na^+チャネルがより電気的により興奮しやすくなることを意味し、てんかんの興奮性の昂進と良く一致した。(3)乳児重症ミオクロニーてんかんで脳内Na^+チャネルSCN1Aの遺伝子異常を計34ヶを44人の患者で発見した。その内容は以前報告されたものとは異なり、多くのミスセンス変異が存在することが分かった。これらとは並行して、ラット胎仔脳cDNAライブラリーから、上記ヒト遺伝子に相当するラットKcnq2,Kcnq3,Chrna4,Chrnb2,Scn2a cDNAのクローン化を完了した。これを利用し、Chrna4の遺伝子異常(変異により,アセチルコリンの感受性は変わらないものの、deactivationが早期におこり、電気的興奮がよわまる)によるチャネル異常を細胞レベルで明らかにした。日本エスエルシーで、今春,Charna4に異常を持つ遺伝子組み換えラットが誕生した。現在,ノックインマウスの作成を始めている。

在上一个财政年度之后，在基因库之后，研究法对中和离子渠道中和中和的发现进行了以下发现。 （1）我在脑Na^+通道SCN1A中发现了两个新的基因异常，并具有广泛的普遍癫痫。 （2）我发现Na^+频道SCN2A基因在日本主导癫痫发作的世界中参与了世界。该突变延迟了Na^+通道失活，表明Na^+离子的流入增加。这意味着突变意味着Na^+通道变得更加令人兴奋，并且与癫痫的兴奋非常一致。 （3）婴儿II Mioclony癫痫病在44例患者中发现Na^+通道SCN1A的34个基因异常。发现内容与之前报道的内容不同，并且有许多其他突变。与这些同时，大鼠胎儿脑cDNA文库已经完成了对应于与上述人基因KCNQ2，KCNQ3，KCNQ3，CHRNA4，CHRNB2，CHRNB2，SCN2A cDNA相当于人基因的大鼠的克隆。使用这种情况，CHRNA4的遗传异常（尽管乙酰胆碱敏感性没有因突变而变化，但在细胞水平上停用了早期的兴奋性，并且电兴奋是良好的）。在日本埃斯西（Eselcy），今年春季Charna4中有异常的遗传重组大鼠诞生了。目前，我们开始创建鼠标敲击。

项目成果

Hirose S., et al.: "The genetics of febrile seizures and related epilepsy syndromes"Brain Dev. (in press). (2003)

Hirose S. 等人：“热性惊厥和相关癫痫综合征的遗传学”Brain Dev。

Sugawara, T., E.Mazaki-Miyazaki, M.Ito, H.Nagafuji, G.Fukuma, A.Mitsudome, K.wada, S.Kaneko, S.Hirose, K.Yamakawa: "Na_v1.1 mutations cause febrile seizures associated with afebrile partial seizures"Neurology. 57. 703-705 (2001)

Sukawara, T., E.Mazaki-Miyazaki, M.Ito, H.Nagafuji, G.Fukuma, A.Mitsudome, K.wada, S.Kaneko, S.Hirose, K.Yamakawa：“Na_v1.1 突变导致发热

Ito, M., H.Nagafuji, H.Okazawa, K.Yamakawa, T.Sugawara, E.Mazaki-Miyazaki, S.Hirose, G.Fukuma, A.Mitsudome, K.Wada, S.Kaneko: "Autosomal dominant epilepsy with febrile seizures plus with missense mutations of the (Na^+)-channel α1 subunit gene, SCN1A"Epil

Ito, M., H.Nagafuji, H.Okazawa, K.Yamakawa, T.Sugarahara, E.Mazaki-Miyazaki, S.Hirose, G.Fukuma, A.Mitsudome, K.Wada, S.Kaneko：“常染色体显性遗传伴有热性惊厥的癫痫加上 (Na^+) 通道 α1 亚基基因 SCN1A"Epil 的错义突变

Okada M., et al.: "Age-dependennt modulation of hippocampal excitability by KCNQ-channels"Epilepsy Research. 58. 81-94 (2003)

Okada M. 等人：“KCNQ 通道对海马兴奋性的年龄依赖性调节”癫痫研究。

Matsushima N., et al.: "Mutation (Ser284Leu) of neuronal nicotinic acetylcholine receptor α4 subunit associated with frontal lobe epilepsy causes faster desensitization of the rat receptor expressed in oocyte"Epilepsy Res. 48. 181-186 (2002)

Matsushima N. 等人：“与额叶癫痫相关的神经元烟碱乙酰胆碱受体 α4 亚基的突变 (Ser284Leu) 导致卵母细胞中表达的大鼠受体更快脱敏”Epilepsy Res. 48. 181-186 (2002)