内分泌撹乱様物質の作用機序に関する研究

内分泌干扰物作用机制研究

基本信息

批准号：
13024227
负责人：
福沢世傑
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

リテラジンBはその分子の形が細長く長さが約30オングストロームと細胞膜に相当する長さではあるが膜透過性増大作用が活性の主たる作用機序ではなく、ある特定のタンパク質に相互作用し、その機能を阻害することにより、活性を示す。このためアイソトープトレーサー法によりラット脳腫瘍細胞C6より、標的分子の探索を進めた結果、膜画分に特異的結合を見いだした。更に陰イオン交換クロマトグラフィーで分画を進めたが活性画分はリポソームに再構成させないと活性を示さない。すなわち、リテラジンBの標的分子は膜蛋白質であるとの知見を得た。またマウスにおいて骨重量増大作用を有すノルゾアンタミンはヒト骨芽細胞Saos-2の突起伸長、増殖促進活性を有することを見出し、骨代謝にかかわる何らかの増殖因子に相互作用する実験事実を見出した。これについてもトリチウム標識体を合成し、骨芽細胞Saos-2の大量培養を行ってそれを材料に標的分子の探索を進めた。そのけっか核画分に特異的結合を見いだし、現在更なる精製を進めている。これまでの研究から活性型ビタミンDや17βエストラジオールとは違った作用機序を示しているので、それ以外の核内レセプターが標的であるとの可能性が強い。

Literazine B具有细长的分子，长度约为30埃，相当于细胞膜的长度，但其主要作用机制不是增加膜的通透性，而是与特定的蛋白质相互作用，显示出活性通过抑制功能。为此，我们利用同位素示踪方法从大鼠脑肿瘤细胞C6中寻找目标分子，结果在膜部分发现了特异性结合。使用阴离子交换色谱法进行进一步分级，但活性级分不显示活性，除非重新溶解到脂质体中。换句话说，我们发现利嗪B的靶分子是一种膜蛋白。我们还发现具有增加小鼠骨重量作用的降安胺具有促进人成骨细胞Saos-2细胞突起伸长和增殖的活性，并发现实验证据表明它与一些参与骨代谢的生长因子存在相互作用。为此，我们合成了一种氚标记化合物，在成骨细胞 Saos-2 细胞中大量培养，并用其作为材料来寻找目标分子。结果，在核级分中发现了特异性结合，目前正在进行进一步纯化。此前的研究表明，其作用机制与活性维生素D和17β雌二醇不同，因此很可能其他核受体是目标。