膜結合型細胞増殖因子と細胞外マトリックスの相互作用によるシグナルの伝達

通过膜结合细胞生长因子和细胞外基质之间的相互作用进行信号传输

基本信息

批准号：
08254220
负责人：
目加田英輔
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

形態形成や組織化における膜結合型細胞増殖因子HB-EGFの作用機構と生理的役割の解明を目的とする。これまでの研究は、HB-EGFがインテグリンやヘパラン硫酸プロテオグリカン、膜4回貫通型蛋白質CD9等と複合体を形成し、細胞間相互作用に働いていることを示唆している。本年度は、細胞接着や細胞増殖におけるこのコンプレックスの役割を明らかにするためにさらに解析を行ない以下の成果を得た。(1)HB-EGF-DRAP27/CD9-インテグリン複合体にアソシエ-トする田の分子の同定細胞の可溶化膜分画を抗インテグリンα3抗体や抗HB-EGFで免疫沈降して、共沈してくるタンパク質の同定を行なった。その結果、CD9と同じTM4ファミリーに属するCD63とCD81もこの複合体に含まれていることが明らかとなった。これらの分子がCD9同様にHB-EGFのジャクスタクライン活性を上昇させるかどうかを調べるたところ、CD81はCD9と同程度の上昇活性を示したが、CD63はCD9ほどHB-EGFのジャクスタクライン活性を上昇させず、TM4ファミリーの間で機能分担があることが示唆された。(2)髄鞘での-DRAP27/CD9の発現解析生体におけるHB-EGF-DRAP27/CD9-インテグリン複合体の役割を知るために各種組織でのCD9の発現を調べた。いくつかの組織でCD9の興味深い発現が観察されたが、特に中枢および末梢神経の髄鞘においてCD9の顕著な発現が認められた。これまで髄鞘において、TM4ファミリーの存在は全く知られておらず、髄鞘の形成と機能維持にこの蛋白が関わっているかどうかが今後の問題として提起された。また、これまでの実験では、髄鞘のCD9にはβ1インテグリンがアソシエ-トしていることが示されている。HB-EGFについても免疫組織化学的手法で調べたが、その存在は認められなかった。

目的是阐明膜结合细胞生长因子HB-EGF在形态发生和组织中的作用机理和生理作用。先前的研究表明，HB-EGF与整联蛋白，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖和四膜膜蛋白CD9和其他蛋白质形成复合物，这些蛋白质作用于细胞 - 细胞相互作用。今年，进行了进一步的分析，以阐明该复合物在细胞粘附和细胞增殖中的作用，并获得了以下结果。（1）鉴定与HB-EGF-DRAP27/CD9-整合素复合蛋白复合物相关的水稻分子溶解的细胞的溶解膜分数被用抗促进蛋白α3抗体和抗HB-EGF免疫沉淀，以鉴定鉴定共沉淀的蛋白质。结果，据显示，属于与CD9相同的TM4家族的CD63和CD81也包含在该复合物中。当我们研究这些分子是否会增加与CD9相似的HB-EGF的近距离活性时，CD81表现出与CD9相似的升高活性，但是CD63并未增加HB-EGF的近距离活性，这表明TM4家族之间存在功能划分。（2）分析-DRAP27/CD9在髓鞘鞘中的表达分析，以了解HB-EGF-DRAP27/CD9-整合素复合蛋白在生物体中的作用，研究了各种组织中CD9的表达。在几个组织中观察到CD9的有趣表达，但观察到CD9的显着表达，特别是在中心神经和外周神经的髓鞘中。到目前为止，在髓鞘鞘中尚未知道髓磷脂的TM4家族的存在，以及该蛋白是否参与了髓鞘的形成和维护，这是将来提出的。先前的实验还表明，β1整联蛋白与髓鞘鞘中的CD9相关。还使用免疫组织化学方法研究了HB-EGF，但未观察到其存在。