膜タンパク質DRAP27を介した膜結合型細胞増殖因子と細胞接着因子のクロスリング

膜结合细胞生长因子和细胞粘附因子通过膜蛋白 DRAP27 交叉环

基本信息

批准号：
06281260
负责人：
目加田英輔
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞接着を介した増殖の制御や細胞情報伝達機構は、生体の仕組みを理解する上で基本的な問題であるばかりでなく、癌細胞の増殖や転移の機構を明らかにする上でも重要な問題である。DRAP27は、膜結合型細胞増殖因子HB-EGFとコンプレックスを形成する一方、細胞間の接着に関与すると云われているインテグリンにアソシエ-トしているタンパク質である。本研究の目的は、DRAP27が細胞増殖因子や細胞接着因子と如何に関わり、どの様な機能を果たしているかの解析であり、今年度は以下の結果を得た。(1)ヒトHB-EGFを発現した細胞EGFファミリー増殖因子依存的に増殖するレシピエント細胞を共培養し、レシピエント細胞が細胞接着依存的に増殖するかどうかを調べたところ、増殖促進が認められた。この増殖促進活性は、HB-EGFの発現量に依存し抗HB-EGF抗体や無毒性ジフテリア毒素で中和されること、この活性はトランスウエルで両者の細胞を隔離すると認められなくなることから、HB-EGFのジャクスタクライン活性によるものであることが示された。DRAP27のジャクスタクライン活性への影響を調べたところ、DRAP27はHB-EGFのジャクスタクライン活性を著しく上昇させた。(2)DRAP27とアソシエ-トするインテグリンの同定を行なった。免疫沈降による共沈殿、架橋試薬によるクロスリンク実験から、DRAP27にアソシエ-トしているインテグリンはα3β1であることを明らかにした。さらに、インテグリンα3β1は、DRAP27/CD9を介してHB-EGFとアソシエ-トしていること、3者のコンプレックスが細胞間接着部位に局在していることがわかった。これらの結果は、DRAP27が細胞接着と細胞増殖を結びつけるキーファクターとして働き、両者の関係を調節にしている可能性を示唆するものである。

通过细胞粘附和细胞信号传导机制调节增殖不仅是理解生物体机制的基本问题，而且在阐明癌细胞增殖和转移机制方面的重要问题。 DARAP27是一种与膜结合的细胞生长因子HB-EGF形成复合物的蛋白质，同时也与整联蛋白相关联，据说与细胞细胞粘附有关。这项研究的目的是分析DARAP27与细胞生长因子和细胞粘附因子的关系以及其执行什么样的功能，今年我们获得了以下结果：（1）以EGF家族生长因子依赖性的方式进行培养的人类HB-EGF表达细胞，以确定依赖性细胞依赖细胞依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性。这种促进生长活性取决于HB-EGF的表达水平，并用抗HB-EGF抗体和无毒白喉毒素中和，并且当两个细胞在Transwell中分离出来，表明它是由HB-EGF的jugxtrine活性引起的。当研究DARAP27对近二氨酸活性的影响时，DARAP27显着增加了HB-EGF的近二氨酸活性。（2）我们确定了与DARAP27关联的整联蛋白。通过交联试剂进行免疫沉淀和交联实验的共沉淀表明与DARAP27相关的整联蛋白为α3β1。此外，发现整联蛋白α3β1通过DARAP27/CD9与HB-EGF相关，并且这三个复合物位于细胞间粘附位点。这些结果表明，DARAP27可以充当连接细胞粘附和细胞增殖的关键因素，从而调节两者之间的关系。