減数分裂に関与するプロテアーゼの作用機構

参与减数分裂的蛋白酶的作用机制

基本信息

批准号：
07283203
负责人：
横沢英良
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

上記研究課題について,当初の研究計画をほぼ完了したので報告する.1.ヒトデの卵成熟において,1-メチルアデニン刺激からMPFの活性化に至る過程に卵母細胞プロテアソームが関与すると提唱されているが,その詳細は不明である.今回我々は,プロテアソームに特異的なインヒビター(MG115)が,卵成熟を阻害することを見出し,Pre-MPFの活性化に確かにプロテアソームが関与するという更なる証拠を得た.しかし,メチルユビキチンが卵成熟を阻害しないことや,卵成熟を強く阻害するZ-Phe-Ser-Arg-Hは有糸分裂を阻害しなiことなどから,卵成熟過程においては,プロテアソームは26S型とは異なる分子種として機能している可能性が考えられた.そこで次に,ホルモン刺激により誘起されるプロテアソームの分子種の動態を解析した.その結果,未成熟卵母細胞には,1500Kと650Kの少なくとも2種類のプロテアソームの分子種が存在し,前者は,ホルモン刺激により一時的に活性が低下した後に再活性化されてから低下するという動態をとることが判った.また,この1500Kプロテアソームは,抗プロテアソーム抗体や抗制御サブユニット抗体により免疫沈降されるが,制御サブユニットをすべて含んでいるわけではなく,26Sプロテアソームとは異なる新規の分子状態をとっていることが示された.さらに,プロテアソームは,卵核胞崩壊時期になってはじめて全ての制御サブユニットの分子集合が完了することも示唆された.2.生理的基質の探索を行ったところ,Gsα蛋白質の分解が,Z-Phe-Ser-Arg-Hによって阻害されることから,ホルモン刺激によりGi蛋白質から遊離するβγサブユニットの生理機能を抑制するGsαサブユニットがプロテアソームによって分解されることによって,βγサブユニットの生理作用が増強されることが示唆された.

关于上述研究课题，我想报告一下，我已经基本完成了原来的研究计划1。有人提出，海星卵母细胞成熟过程中，卵母细胞蛋白酶体参与了从1-甲基腺嘌呤刺激到MPF激活的过程。 ,细节未知。在这里，我们发现蛋白酶体特异性抑制剂（MG115）抑制卵母细胞成熟，这进一步证明蛋白酶体确实参与了 Pre-MPF 激活。然而，由于甲基泛素不抑制卵母细胞成熟，并且强烈抑制卵母细胞成熟的Z-Phe-Ser-Arg-H不抑制有丝分裂，因此与26S型不同，在卵母细胞成熟过程中不存在蛋白酶体分子。因此，我们接下来分析了激素刺激诱导的蛋白酶体分子种类的动态。结果，未成熟的卵母细胞至少含有两种蛋白酶体分子，1500K和650K类型。研究发现，蛋白酶体存在分子种类，前者表现出动态行为，其活性因激素刺激而暂时降低，然后重新激活，然后降低。而且，这种1500K的蛋白酶体可以被抗蛋白酶体抗体激活和阻力结果表明，蛋白酶体被调节亚基抗体免疫沉淀，但不包含所有调节亚基，并且具有与26S蛋白酶体崩溃不同的新分子状态。也有人提出，所有调节亚基的分子组装仅在一定的时间内完成。2.在寻找生理底物时，发现Gsα蛋白的降解是由Z-Phe-Ser-Arg-引起的。 H.这表明，抑制激素刺激下Gi蛋白释放的βγ亚基的生理功能的Gsα亚基被蛋白酶体降解，从而增强了βγ亚基的生理作用。