増殖因子と幹細胞及び巨核芽球白血病:正常巨核球の分化増殖と巨核球系腫瘍との関連

生长因子、干细胞与巨核细胞白血病：正常巨核细胞与巨核细胞肿瘤分化增殖的关系

基本信息

批准号：
02256201
负责人：
佐藤武幸
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02256201/
关键词：
巨核芽球細胞株 CMK インタ-ロイキン6 オ-トクライオン機構 CD34 造血幹細胞分化

项目摘要

巨核球系細胞株CMKよりリミテイングダイル-ション法により数種の亜株を得た。これらの内CMK6及びCMK11ー5の2種について検討した。CMK6は形態上も表面マ-カ-上もより未熟な巨核芽球であり、CMK11ー5は共により成熟した巨核芽球であった。Northern blot法にて、CMK細胞より、インタ-ロイキン6(ILー6)のmRNAを検出した。しかし、培養液中のILー6量は微量であり、又ILー1処理でも、わずかの増加を認めたのみであった。CMK細胞をILー6で処理すると、増殖が促進された。増殖は、浮遊細胞系及びコロニ-・アッセイ系両者において確認された。CMK細胞を抗ILー6抗体で処理すると、CMK細胞の増殖は阻害された。これらにより、CMK細胞の増殖の一部にオ-トクライン機構が働いている可能性が示された。更に、CMK細胞はILー6により表面マ-カ-上巨核球系への分化を誘導された。CD34抗体は、造血幹細胞を認識する抗体である。CMK細胞は、CD34抗体に反応し、造血幹細胞としての形質を有している。本抗体に対する反応をTPAで分化誘導したCMK細胞、及び巨核球により分化した亜株であるCMK11ー5細胞で検討すると、両者ともCMK細胞と比べ反応細胞の比率が低下した。又ILー6処理にても反応細胞の陽性率は低下した。この結果より、CMK細胞が分化に伴って消失してゆくmRNAを検討することにより、造血幹細胞に特異的な物質を新たに同定しうる可能性が得られた。これにより、造血幹細胞の濃縮・純化が促進される可能性がある。

采用有限稀释法从巨核细胞系CMK中获得多个亚株。对其中的两个 CMK6 和 CMK11-5 进行了研究。 CMK6在形态和表面标记方面是更不成熟的巨核细胞，CMK11-5都是更成熟的巨核细胞。通过Northern印迹法从CMK细胞中检测白细胞介素6（IL-6）mRNA。然而，培养液中IL-6的量微乎其微，即使用IL-1处理，也仅观察到轻微的增加。用 IL-6 处理 CMK 细胞可促进增殖。在悬浮细胞和集落测定系统中均证实了增殖。当用抗IL-6抗体处理CMK细胞时，CMK细胞增殖受到抑制。这些结果表明自分泌机制可能参与部分CMK细胞的增殖。此外，IL-6 诱导 CMK 细胞在表面标记上分化为巨核细胞谱系。 CD34抗体是一种识别造血干细胞的抗体。 CMK细胞与CD34抗体发生反应，具有造血干细胞的特性。当在 TPA 诱导分化的 CMK 细胞和由巨核细胞分化的亚系 CMK11-5 细胞中检查对该抗体的反应时，两种情况下反应细胞的比例均低于 CMK 细胞。 IL-6处理后反应细胞的阳性率也降低。这些结果提供了通过检查随着 CMK 细胞分化而消失的 mRNA 来识别造血干细胞特异性新物质的可能性。这可以促进造血干细胞的浓缩和纯化。