多価不飽和脂肪酸による白血球機能の調節

多不饱和脂肪酸对白细胞功能的调节

• 批准号: 01636508
• 负责人: 水上 茂樹
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01636508/
• 关键词: 好中球; ラット肝; ロイコトリエンB_4; チトクロムP-_<450>; ω-水酸化反応

好中球は食作用時や種々の刺激に応じて、細胞膜リン脂質からアラキドン酸を遊離しロイコトリエンB_4を生産し炎症部位に好中球を集める。ロイコトリエンB_4はヒト好中球によりω水酸化される。この反応は好中球ミクロソ-ムに特異的なチトクロムP_<450>(ロイコトリエンB_4ω-ヒドロキシラ-ゼ)によるものである。水酸化誘導体はさらに酸化されてカルボキシ誘導体となり白血球走化活性等の主要な生理活性を失う。この反応は細胞質のアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼおよびミクロソ-ムのアルデヒドデヒドロゲナ-ゼにより起きる。今年度は、ヒト好中球細胞質からω-ヒドロキシ細胞酸に特異的なアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼを単離し、好中球ミクロソ-ムとの共同作用によって20-ヒドロキシロイコトリエンB_4を20-カルボキシル誘導体にすることを示した。単離したアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼの分子量は80KDa(37KDaのダイマ-)で、その等電点はpH6.0であった。20-ヒドロオキシロイコトリエンB_4はまた、ロイコトリエンB_4ω-ヒドロキシラ-ゼ(チトクロムP_<450>)によって20-オキソロイコトリエンB_4を経て20-カルボキシロイコトリエンB_4となる。すなわち、水酸化および2段階の脱水素の3段階からなる反応がチトクロムP_<450>系によって触媒される。このことは、これらの反応の一酸化炭素による阻害が450nmの光により回復することや、エイコサペンタエン酸に由来するロイコトリエンB_5によるヒドロキシ誘導体の脱水素反応の競争阻害などにより示された。

中性粒细胞在吞噬作用期间从细胞膜磷脂和对各种刺激的响应中释放出蛛网膜酸，产生白细胞三烯B_4，并在炎症部位收集嗜中性粒细胞。白细胞B_4是由人类嗜中性粒细胞化的ω-羟基。该反应是由于中性粒细胞特异性细胞色素p_ <450>（白细胞B_4Ω-羟化酶）引起的。羟化衍生物被进一步氧化为羧基衍生物，并失去主要的生理活性，例如白细胞趋化活性。该反应是由于细胞质醇脱氢酶和微粒体醛脱氢酶引起的。今年，我们已经表明，从人类嗜中性粒细胞质中分离出针对ω-羟基纤维酸的酒精脱氢酶，并通过与中性粒细胞微粒细胞共同作用，将20-羟基核B_4转化为20-羧基衍生物。分离的藻holdedrydraze的分子量为80 kDa（37 kDa dyma-），其等电点为pH 6.0。 LeukotrieneB_4Ω-羟化酶（细胞色素p_ <450>）到达20-羧基列酮B_4的20-羟基丁三烯B_4也通过LeukotrieneB_4Ω-羟化酶（通过LeukotrieneB_4Ω-羟化酶）传递20-氧氯烷基B_4。也就是说，羟基化和两步脱氢的三步反应是由细胞色素P_ <450>系统催化的。通过光在450 nm处通过这些反应恢复一氧化碳的抑制作用，以及对源自eicosapentaenoic酸的白细胞B_5脱氢衍生物的脱氢抑制作用，证明了这一点。

项目成果

Osaki,M: "N^+a/H^+ exchange modulates the production of leukotriene B_4 by human ncutrophils" Biochem.J.257. 751-758 (1989)

Osaki,M：“N^a/H^交换调节人嗜中性粒细胞白三烯 B_4 的产生”Biochem.J.257。

Sumimoto,H.: "Oxidation of 20-hydroxy leukotriene B_4 to 20-carboxy-leukotriene B_4 by human neutrophil microsomes" J.Biol.Chem.265. (1990)

Sumimoto,H.：“人中性粒细胞微粒体将 20-羟基白三烯 B_4 氧化为 20-羧基白三烯 B_4”J.Biol.Chem.265。

Nozaki,M.: "Reconstitution of the partially purified membrane component of the superoxide-generating NADPH oxidase of pigneutrophils with phospholipid" Eur.J.Biochem.(1990)

Nozaki,M.：“用磷脂重建猪中性粒细胞超氧化物生成 NADPH 氧化酶的部分纯化膜成分”Eur.J.Biochem.(1990)

Gotoh,Y.: "Purification and characterization of 20-hydroxy-leukotriene B_4 dchydrogenase in human neutrophils" Eur.J.Biochem.179. 315-321 (1989)

Gotoh,Y.：“人中性粒细胞中 20-羟基白三烯 B_4 脱氢酶的纯化和表征”Eur.J.Biochem.179。

Ishida,K.: "GTP-dependent and iudependent activation of superoxide producing NADPH oxidase in a neutrophil cell-free system" FEBS Lett.243. 169-172 (1989)

Ishida,K.：“中性粒细胞无细胞系统中产生 NADPH 氧化酶的超氧化物的 GTP 依赖性和 iu 依赖性激活”FEBS Lett.243。