MSF/14-3-3蛋白質及びその標的蛋白質との複合体の構造解析

MSF/14-3-3蛋白及其与靶蛋白复合物的结构分析

• 批准号: 09249216
• 负责人: 三原 勝芳
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09249216/
• 关键词: ミトコンドリア; 前駆体蛋白質; 蛋白質輸送; シグナルペプチド; TOM; TIM; 膜透過; シャペロン

ミトコンドリアへの前駆体蛋白質は細胞質シャペロンHsp70とMSFに依存して外膜上のインポート受容体に運ばれた後に外膜の輸送装置(TOM複合体)と内膜の透過装置(TIM複合体)の働きによってそれぞれの区画へと輸送される。本年度は以下の事柄を明らかにした。(1)ミトコンドリア外膜のインポート受容体Tom70とTom20の細胞質領域と前駆体との結合に及ぼす細胞質シャペロンMSFおよびHsp70の効果をin vitro系で解析した。その結果、(i)前駆体の種類に関わらずTom70への結合は細胞質シャペロンMSFに依存すること、(ii)尿素変した前駆体やHsp70で安定化した前駆体は直接Tom20に結合すること、(iii)前駆体/MSF複合体はTom70と結合し、前駆体/MSF/Tom70複合体を形成し、次にATPの加水分解によってMSFが脱離し前駆体/Tom70複合体が形成されること、(iv)Tom70、Tom20ともにミトコンドリアターゲティング配列を認識すること、(v)Tom70、Tom20間での前駆体のトランスファーがおこること、等を明らかにし、インポート受容体への前駆体ターゲティングに果たす細胞質シャペロンの重要性を明らかにした。(2)ラット肝ミトコンドリアの輸送因子としてTom20、metaxin、Tim17、Tim23、Tim44を同定しその性質の解析を行った。

将前体的蛋白转移到外膜上的进口受体上，取决于细胞质伴侣HSP70和MSF，然后通过外膜运输设备（TOM Complex）的功能和内膜Permbrane Permabilizer（Tim Complex）（Tim Complexp）运输到相应的隔室。今年，我们透露了以下内容：（1）细胞质伴侣MSF和HSP70对细胞质区域的结合以及线粒体外膜进口受体TOM70和TOM20的前体的影响。结果，我们揭示了（i）与TOM70的结合取决于细胞质伴侣MSF，无论前体的类型如何，（ii）与尿素和HSP70稳定的前体直接与TOM20结合，（iii）（iii）前体/MSF复合物与tom70结合，然后与tom70结合，然后与MSF置于MSF/MSF/MSF/MSF/MSF/70，并将其与MSF结合。 （iv）TOM70和TOM20都识别线粒体靶向序列，（v）在TOM70和TOM20之间的前体转移，以及细胞质伴侣对将前体靶向进口受体的重要性。 （2）TOM20，Metaxin，Tim17，Tim23和Tim44被鉴定为大鼠肝脏线粒体中的转运因子，并分析了它们的性质。

项目成果

L.C.Armstrong: "Metaxin is a component of a preprotein import complex in the outer membrane of the mammalian mitochondria." J.Biol.Chem.272. 6510-6518 (1997)

L.C.Armstrong：“Metaxin 是哺乳动物线粒体外膜中前蛋白输入复合物的组成部分。”

T.Komiya: "Binding of mitochondrail precursor proteins to the cytoplasmic domains of the import receptors Tom70 and Tom20 is determined by cytoplasmic chaperones." EMBOJ.16. 4267-4275 (1997)

T.Komiya：“线粒体前体蛋白与输入受体 Tom70 和 Tom20 的细胞质结构域的结合是由细胞质伴侣决定的。”