血管内皮細胞におけるエンドセリンー1の産生機構

血管内皮细胞内皮素1的产生机制

基本信息

批准号：
03268232
负责人：
森本史郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University of Pharmaceutical Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

培養ブタ血管内細胞を用い、以下の実験結果を得た。1.培養ブタ血管内皮細胞の膜分画をbig ETー1あるいはbig ETー3と反応させた場合、反応溶液中にそれぞれETー1、ETー3産生増加が認められ、これらの作用はフォスフォラミドンにより顕著に阻害された。2.培養ブタ血管内皮細胞10^8個から膜分画を調製し、0.5%CHAPSにより可溶化した。COSMOGEL QAカラムを用いて可溶化成分の陰イオン交換クロマトグラフィ-を行い、各溶出分画のビッグエンドセンリー1(big ETー1)変換活性を測定したところ、塩濃度0.2Mに相当する分画に変換活性ピ-クが認められた。さらに上記ピ-ク分画についてゲル濾過を行い、各溶出分画の変換活性を測定した結果から、フォスフォラミドン感受性ETー1変換酵素の分子量は約300ー350kDaであることが示された。また、ゲル濾過後の各溶出分画についてbig ETー3変換活性を測定したところ、big ETー1変換活性とほぼ同様の溶出パタ-ンが得られた。3.無傷の培養ブタ血管内皮細胞をbig ETー1と一定時間加温すると、時間に応じたいETー1産生がみられた。また同様の変換反応はbig ETー3を基質として用いた場合にも認められた。4.以上、血管内細胞にはbig ETー1及びbig ETー3変換活性を有する分子量300ー350kDaのフォトフォラミドン感受性エンドセリン変換酵素が存在することが明らかとなった。

通过使用培养猪的内部细胞获得以下实验结果。 1。当培养物的一部分培养猪 - 哈田型内皮细胞对大ET -1或大ET -3反应时，允许反应溶液分别增加ET -1和ET -3的产生，这些影响分别是Foss。 2。培养10^8膜各方的培养基生地内皮细胞，并通过0.5％的CHAPS解决。使用Cosmogel QA柱执行溶解化成分的离子替换色谱法，并测量每个洗脱液的每个洗脱液的转化活性，盐浓度等于0.2m。此外，上述猪的凝胶过滤的结果以及测量每种光洗脱的转化活性表明，Fosforamidon敏感ET-1转化酶的分子量约为300-350 kDa。此外，当测量凝胶过滤后每个洗脱液的大ET-3转化活性时，获得的洗脱模式与大ET-1转化活性几乎相同。 3。当猪的猪的内皮细胞在一定时间段内加热大ET -1时，发现ET -1产生。当将大ET -3用作底物时，也识别出相同的转化反应。 4。已经揭示了内部细胞的分子量为300-350kDa，这是一种具有BIG ET -1和BIG ET -3转化活性的光膜片敏感的内素转化酶。