Development of a new wound treatment with reduced HMGB1 using non-thermal atmospheric pressure plasma

使用非热常压等离子体开发减少 HMGB1 的新型伤口治疗方法

• 批准号: 22H03250
• 负责人: 森 秀樹
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03250/
• 关键词: 非平衡大気圧プラズマ; HMGB1; 創傷治癒; 還元; プラズマ; 還元状態; 角化細胞; 還元型 HMGB1

１）プラズマによるHMGB1の還元。HMGB1のプラスミドを使用し、細胞障害性が出ない最適条件（電圧、波長、照射時間）でプラズマ照射を行った。HMGB1はプラズマ照射により分解されてしまい、目的の還元状態に到達することはできなかった。そのため、プラズマに用いるガスをCO2やそのほかのガスに変更し、培養液内で還元作用を起こす計画を進行中。２）培養角化細胞への直接作用の検証。単層培養角化細胞に対しReduced-HMGB1を加えた培養液をプラズマ照射の有無、還元薬使用の有無により4群に分け、細胞の生存率、アポトーシス、細胞増殖、遊走能、分化誘導などを検討し、プラズマ照射による還元型HMGB1の効果を解析した。単層培養角化細胞のスクラッチテストでは、プラズマ照射群で有意に細胞増殖・または遊走能の活性化がみられ、それに加えてHMGB1を添加した群ではさらに有意な結果を得られた。３）通常マウスBalbcの背面に８ｍｍパンチで創傷を作製し、マウスの背部に２秒間プラズマを照射後、HMGB1を含む溶液をパッチテスターで貼付した。プラズマ照射及びHMGB1含有テスターの交換は2日ごとに行い、プラズマ照射群で創傷治癒の促進がみられた。４）poly(I:C)を用いて角化細胞を刺激して炎症性サイトカインを誘導し、プラズマの抗殺菌効果、抗炎症効果を検討し、一定の効果が得られたが、HMGB1含有群を含め有意差はみられなかった。

1）血浆减少HMGB1。使用HMGB1的质粒，在没有引起细胞毒性的最佳条件（电压，波长，辐照时间）下进行血浆照射。 HMGB1因血浆辐射而分解，无法达到所需的降低状态。因此，目前正在计划将血浆中使用的气体更改为二氧化碳或其他气体，并在培养基中引起降低效果。 2）验证直接作用对培养的角化细胞的验证。将减少HMGB1添加到单层角化细胞中的培养基根据血浆辐射的存在或不存在分为四类，并且存在或不存在还原药物，细胞存活率，凋亡率，细胞增殖，迁移，迁移能力和分化的诱导率降低了HMGB1的影响。单层角化细胞的刮擦测试在血浆辐照组中显示出显着的细胞增殖或迁移潜力，在添加HMGB1的组中获得了更明显的结果。 3）使用8 mm的打孔在正常小鼠BALBC的背面造成伤口，然后用血浆辐射小鼠2秒钟，用贴片测试仪施加含有HMGB1的溶液。每两天更换每隔两天的血浆辐射和含HMGB1的测试仪，并在血浆辐照组中促进了伤口愈合。 4）使用Poly（I：C）刺激角化细胞诱导炎症细胞因子，研究了血浆的抗细菌和抗炎作用，并获得了某些效果，但没有观察到显着差异，包括含有HMGB1的抗菌作用。

项目成果

表皮角化細胞に対するHMGB1 A-boxとB-boxの作用効果

HMGB1 A-box和B-box对表皮角质形成细胞的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 森 秀樹;戸澤麻美;松本麻由ほか
• 通讯作者: 松本麻由ほか

HMGB1 B-box induces wound healing in keratinocyte.

HMGB1 B-box 诱导角质形成细胞伤口愈合。

• 发表时间: 2022
• 作者: Hideki Mori;Masamoto Murakami;Jun Muto;et al
• 通讯作者: et al