胆汁酸ヒト化マウスを用いたNAFL/NASH/HCC進展メカニズムの解明

使用胆汁酸人源化小鼠阐明 NAFL/NASH/HCC 进展机制

基本信息

批准号：
22H02853
负责人：
本多彰
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Tokyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

マウスは医学研究に最も広く用いられている動物である。しかし、胆汁酸組成がヒトと大きく異なるため、胆汁酸の関与が推測される代謝疾患や発癌に関して、従来の研究結果をヒトに外挿するには注意が必要である。この問題を解決するために、本研究では我々が開発した胆汁酸ヒト化マウスを用いて、これまでより格段にヒトに近い非アルコール性脂肪肝（NAFL）/非アルコール性脂肪肝炎（NASH）/肝細胞癌（HCC）のモデルを作製し、胆汁酸が病態の進展に与える影響を解明することを目的としている。本研究目的に従って、令和4年度は下記のように新しいNAFL/ NASH/ HCCモデルの作製を開始し、サンプルの得られたものから順次解析を行なった。（1） 10週齢のWTマウス（C57BL/6J）と胆汁酸ヒト化マウス（C57BL/6J baseのCyp2a12/Cyp2c70 double KO）を標準食（オリエンタル酵母社製CRF-1）または高脂肪高ショ糖食（同社製F2HFHSD）で飼育した。（2）15週後、30週後、47週後に一定数ずつ安楽死させ、体重、精巣上体脂肪の秤量と、血液、胆嚢胆汁、肝組織、小腸、盲腸内容物、糞便の採取と保存を行った。また残りのマウスは60週後に採材の予定であり継続飼育中である。（3）高脂肪高ショ糖食投与のWTマウスとDKOマウスで体重増加の程度に差はなかったが、30週後に行なったグルコースおよびインスリン負荷試験によるインスリン抵抗性の測定では、DKOマウスの方がインスリン抵抗性が軽い結果であった。しかし、高脂肪高ショ糖食投与のDKOマウスの方がWTより病理学的に線維化の進行が見られ、高脂肪高ショ糖食投与47週後のDKOマウスには半数以上で肉眼的にHCCの発生が認められた。

小鼠是医学研究中使用最广泛的动物。然而，由于胆汁酸的组成与人类显着不同，因此将之前关于推测与胆汁酸有关的代谢疾病和致癌作用的研究结果外推到人类时需要谨慎。为了解决这个问题，在本研究中，我们使用我们开发的胆汁酸人源化小鼠来治疗非酒精性脂肪肝（NAFL）/非酒精性脂肪性肝炎（NASH）/肝细胞癌（HCC）模型并阐明胆汁酸对疾病进展的影响。根据本研究的目的，我们从2020财年开始创建如下所示的新NAFL/NASH/HCC模型，并对获得的样本进行一一分析。 (1)将10周龄WT小鼠(C57BL/6J)和胆汁酸人源化小鼠(C57BL/6J基础Cyp2a12/Cyp2c70双KO)饲喂标准饲料(东方酵母株式会社制CRF-1)或高脂肪、高蔗糖。它们是通过食物饲养的（F2HFHSD 由同一家公司生产）。（2）15、30、47周后，安乐死一定数量的动物，称重体重、附睾脂肪，收集并保存血液、胆囊胆汁、肝组织、小肠、盲肠内容物和粪便。。剩余的小鼠计划在 60 周后收获并持续饲养。 (3)虽然饲喂高脂肪、高糖饮食的WT小鼠和DKO小鼠的体重增加程度没有差异，但使用30周后进行的葡萄糖和胰岛素耐量试验来测量胰岛素抵抗。抵抗力轻微。然而，与 WT 相比，饲喂高脂肪、高蔗糖饮食的 DKO 小鼠中观察到纤维化的病理进展，并且超过一半的 DKO 小鼠在施用高脂肪、高蔗糖饮食 47 周后表现出宏观纤维化观察HCC的发生情况。