毒素原性大腸菌耐熱性下痢毒素の受容体の毒素結合部位
产毒大肠杆菌热稳定性腹泻毒素受体的毒素结合位点
基本信息
- 批准号:04670242
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1992
- 资助国家:日本
- 起止时间:1992 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
毒素原性大腸菌が産生する耐熱性下痢毒素の受容体(STa受容体)は、膜結合型グアニル酸シクラーゼGC-Cであることが明らかになった。その構造と機能を解析する目的でブタGC-C遺伝子のクローニングを行った。ラットGC-C遺伝子の一部をプローブとしてブタの小腸から作製したcDNAライブラリーをスクリーニングした結果、17個のクローンを得た。これらのクローンよりブタGC-C遺伝子の塩基配列(3773塩基)決定した。ブタGC-Cをコードしている塩基配列は3219塩基で24残基のアミノ酸がシグナルペプチドであり、ブタGC-Cは 1049残基のアミノ酸からなる約121kDaの糖タンパク質であった。 ブタGC-Cの407残基目のIleから430残基目のLeuまでが高い疎水性を示し、 この部分が細胞膜を一介貫通している領域と考えられた。このGC-Cの細胞内領域は心房性ナトリウム利尿ペプチドの受容体として知られる他の膜結合型グアニル酸シクラーゼGC-AやGC-Bと相同性が高く、GC-Cに於いてもNー末端側の細胞外に分布するリガンド結合領域、膜貫通領域、チロシンキナーゼ様領域、グアニル酸シクラーゼ活性領域の4つの領域に機能分けされつと推察された。特にGC-CのC末端部分の60残基のアミノ酸の内約20%がSerとGlnである構造上の特徴を有していた。ブタGC-CとラットGC-C及びヒトGC-Cのアミノ酸配列の相同性は、それぞれ82%、87%であった。Nー末端側の細胞外領域に於いては71%、76%、Cー末端側の細胞内領域に於いては90%、95%であり、細胞外領域に比べ細胞内領域の相同性が極めて高いことが判った。現在ブタGC-Cのデリージョンミュウタントを作製し、STとの結合部位を調べている。
毒素大肠杆菌(STA受体)产生的热耐腹泻毒素的受体揭示为结合膜结构的鸟苷酸环化酶GC-C-C。猪GC-C基因被克隆以分析其结构和功能。使用一部分大鼠GC-C基因作为探针,从猪的小肠中筛选了一个cDNA文库,并获得了17个克隆。这些克隆用于确定猪GC-C基因的碱基序列(3,773个碱基)。编码PIG GC-C的碱基序列为3,219个碱基,其中24个氨基酸为信号肽,PIG GC-C是约121 kDa的糖蛋白,约有1049个氨基酸。在猪GC-C的残基430处的残基407到LEU的ILE显示出较高的疏水性,这部分被认为是穿透细胞膜的区域。 The intracellular region of GC-C is highly homologous to other membrane-bound guanylate cyclases GC-A and GC-B, known as receptors for atrial natriuretic peptides, and it is estimated that in GC-C it is functionally divided into four regions: the ligand-binding region, the transmembrane region, the tyrosine kinase-like region, and the active guanylate cyclase region, which分布在N末端。特别是,GC-C的C末端部分中约有20%的氨基酸具有Ser和GLN的结构特征。 PIG GC-C,RAT GC-C和人GC-C的氨基酸序列同源性分别为82%和87%。 N末端的细胞外区域为71%和76%,C末端侧的细胞内区域为90%和95%,表明细胞内区域的同源性显着高于细胞外区域。当前,正在生产Pig GC-C的deregion Miutant,并研究了与ST的结合位点。
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
T.Hirayama: "Glycoprotein receptors for a heat-stable enterotoxin (STh) produced by enterotoxigenic Escherichia xcoli" Infect.Immun.60. 4213-4220 (1992)
T.Hirayama:“产肠毒素大肠杆菌产生的热稳定肠毒素 (STh) 的糖蛋白受体”Infect.Immun.60。
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和田 昭裕: "毒素原性大腸菌の産生する耐熱性エンテロトキシンとその受容体蛋白質" 化学と生物. 30. 224-232 (1992)
Akihiro Wada:“产毒大肠杆菌及其受体蛋白产生的热稳定肠毒素”,化学与生物学,30. 224-232 (1992)。
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平山 壽哉: "毒素原性大腸菌が産生する耐熱性エンテロトキシンのレセプター" Cell Science. 8. 23-32 (1992)
Toshiya Hirayama:“产毒大肠杆菌产生的耐热肠毒素受体”《细胞科学》,8. 23-32 (1992)。
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A.Wada:“大肠杆菌耐热肠毒素(STa)猪受体的鉴定和克隆”Jpn.J.Med.Sci.Biol.45(6)。
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