歯周疾患と栄養の関係(分子疫学的アプローチ)

牙周病与营养的关系（分子流行病学方法）

基本信息

批准号：
14657542
负责人：
小澤雄樹
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

サイトカイン関連遺伝子検査とHLA遺伝子検査1.TaqMan PCR法の遺伝子多型分析への導入歯肉溝滲出液中のサイトカイン(TNF-α、IL-1)を測定するためフィールドで歯肉溝滲出液を採取することは設備や運搬が困難であることが判明。その代わり、フィールドでの採取と運搬が容易な頬粘膜剥離細胞を用い、そのDNA上のサイトカインに関連する遺伝子多型のタイピングを試みた。まず初めに、IL-1β領域の一塩基多型(Single Nucleotide Polymorphism : SNP)解析をTaqMan PCR法で行った。TaqMan PCR法とは、IL-1β領域の多型部位にハイブリダイズするような2種類の蛍光色素でラベルされたTaqManプローブを用いてPCRを行う。TaqManプローブ上の2種類の蛍光色素は、物理的距離が近いため蛍光強度が低下した状態におかれているが、対立遺伝子特異的PCRプライマーと鋳型DNAが一致した場合はPCRが進行し、TaqManプローブが分解され、色素が遊離し蛍光を発する。この蛍光強度を測定することで、PCR産物を定量するという方法である。2.サイトカインの遺伝子検査被験者24名のIL-1β領域をTaqMan PCR法でSNP解析したところ、全ての被験者で反応が確認された。このことから、前年に頬粘膜剥離細胞から得られたDNA抽出物のDNA量で、TaqMan法を用いた遺伝子検査が行えることが明らかになった。IL-1β領域のSNP解析結果は、ホモが13名、ヘテロが11名であった。他のサイトカイン関連遺伝子の分析を、現在TaqMan PCR法によって行っているところである。3.HLA遺伝子検査DNAのHLA遺伝子検査は、DQB1とDRB1についてのみ、現在行っているところである。

与细胞因子相关的基因检测和HLA基因测试1。使用Taqman PCR分析遗传多态性的分析，以测量牙龈硫液积液中的细胞因子（TNF-α，IL-1），被发现难以准备和运输。取而代之的是，我们尝试使用颊粘膜脱离细胞在其DNA上与细胞因子相关的基因多态性键入，这些细胞易于收集和运输。首先，使用Taqman PCR对IL-1β区域进行了单核苷酸多态性（SNP）分析。 Taqman PCR方法涉及PCR使用带有两种类型的荧光染料标记的Taqman探测器，这些荧光染料与IL-1β区的多态位点杂交。 Taqman探测器上的两种类型的荧光染料处于由于物理距离近距离荧光强度降低的状态，但是当等位基因特异性的PCR引物和模板DNA匹配，PCR的收益，PCR的收益，Taqman探测器降解，并且释放染料并释放并释放荧光。该方法涉及通过测量荧光强度来量化PCR产物。 2。细胞因子基因测试：使用Taqman PCR分析24名受试者的IL-1β区域时，在所有受试者中都确认了反应。这表明可以使用前一年从颊粘膜脱离细胞中提取的DNA量进行使用Taqman方法进行基因测试。 IL-1β区域的SNP分析结果表明，13例同源患者和11例异源患者。 Taqman PCR目前正在对其他细胞因子相关基因进行分析。 3。目前仅针对DQB1和DRB1进行HLA基因测试HLA基因测试。