エストロゲンによる心臓および脳毛細血管網構築の制御とその生理的役割に関する研究

雌激素调节心脑毛细血管网络构建及其生理作用的研究

基本信息

批准号：
14657413
负责人：
佐久間一郎
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657413/
关键词：
エストロゲンラット冠動脈脳血管 VEGF eNOS 卵巣摘出アポトーシス

项目摘要

卵巣摘出による閉経、および閉経後のエストロゲン補充(HRT)が、心臓と脳の毛細血管網の構築にどのような影響を及ぼすかについて、組織学的に確認するとともに、その際のエストロゲン受容体のサブタイプの関与、血管増殖因子の変化、アポトーシスの関与等について免疫組織学的、分子生物学的に検討した。40週令の経産雌性Wistarラットを用意し、以下の群に分けた。A : sham手術群:腹部切開したのみで縫合した群。B:卵巣摘出群:両側卵巣を腹部切開により摘出し、縫合した群。C:エストロゲン補充群:卵巣摘出後、皮下に浸透圧ミニポンプを包埋して縫合し、水溶性17β-エストラジオール3μg/日を持続投与した群。4週間後にラットから心臓および脳を摘出し、総毛細血管密度、血管増殖因子とその受容体のmRNAおよび蛋白の発現、アポプトーシスのマーカー、NO合成酵素(eNOS)の発現、エストロゲン受容体(ER)サブタイプの発現、HIF (ischemia inducible factor)の発現を検索した。卵巣摘出群では、心臓および脳において、総毛細血管密度が減少し、VEGFとその受容体KDRがmRNAおよび蛋白レベルで減少し、アポトーシスマーカーが増加し、eNOS発現が低下し、ER-βが減少した。これらの変化はエストロゲン補充により回復した。以上から、ラットでは、エストロゲンがER-β-VEGF-KDR-eNOS系により心および脳毛細血管網を制御し、虚血を防いでいる可能性が示された。一方、ER-αノックアウトマウス、およびER-βノックアウトマウスを用いた検討により、マウス心ではER-αが、よりVEGF-KDR-eNOS系心毛細血管網に関与することが示唆され、動物種によりERサブタイプの影響が異なるものと考えられた。

我们将通过组织学证实因卵巢切除和绝经后雌激素替代（HRT）导致的更年期对心脏和大脑毛细血管网络构建的影响，并研究在此过程中雌激素受体亚型的参与、血管生长的变化。通过免疫组织学和分子学方法研究了细胞凋亡的因素和参与。准备40周龄的经产雌性Wistar大鼠并分成以下组。 A：假手术组：仅切开腹部并缝合的组。 B：卵巢切除组：通过腹部切口切除双侧卵巢并缝合的组。 C：雌激素补充组：卵巢切除后，皮下埋入微型渗透泵并缝合，持续给予水溶性17β-雌二醇3μg/天。 4周后，摘除大鼠心脏和大脑，检测总毛细血管密度、血管生长因子及其受体的mRNA和蛋白表达量、细胞凋亡标志物、一氧化氮合酶（eNOS）和雌激素受体（ER）的表达量。我们搜索了亚型表达和 HIF（缺血诱导因子）表达。去卵巢组心脏和大脑中总毛细血管密度降低，VEGF及其受体KDR mRNA和蛋白水平降低，凋亡标志物升高，eNOS表达降低，ER-β降低。这些变化可以通过补充雌激素来逆转。这些结果表明，在大鼠中，雌激素可能通过 ER-β-VEGF-KDR-eNOS 系统控制心脏和大脑毛细血管网络并预防缺血。另一方面，使用 ER-α 敲除小鼠和 ER-β 敲除小鼠的研究表明，ER-α 更多地参与小鼠心脏中的 VEGF-KDR-eNOS 心脏毛细血管网络；人们认为 ER 亚型的影响；是不同的。