alpha-1アドレナリン受容体と相互作用するタンパク質の同定と機能解析

与 α-1 肾上腺素能受体相互作用的蛋白质的鉴定和功能分析

• 批准号: 14657023
• 负责人: 鈴木 史子
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: University of Fukui (2004)福井医科大学 (2002-2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657023/
• 关键词: アドレナリン受容体; スナピン; 細胞内カルシウム; 神経伝達物質; PC12細胞; 細胞内情報伝達; 相互作用; Yeast Two Hybrid

これまでに、神経細胞内に存在するスナピンという分子が神経伝達物質の分泌に関与していることが示されていたが、その機能は未だ十分に解明されていなかった。本研究において、我々はこのスナピン分子がalpha-1アドレナリン受容体と相互作用し、受容体の活性化により惹起される反応を調節、修飾していることを突き止め、その現象を以下の点について明らかにした。1.免疫沈降法及び2イーストハイブリッド法を用いて、スナピンがalpha-1アドレナリン受容体のC末部位と相互作用していることを明らかにした。2.蛍光ラベルしたスナピンと受容体を用いて細胞内局在を調べた結果、単独では受容体は細胞膜上に、スナピン分子は細胞質に広く分布するのに対して、共発現の場合、両者が樹上突起付近に局在すること、また受容体のアゴニスト刺激により、この局在傾向が強まっていくことが観察された。3.受容体とスナピンを共発現したPC12細胞における、受容体活性化により惹起される反応の相違について1)ドーパミン分泌スナピン共発現細胞でのドーパミン分泌は、受容体単独細胞の2倍に増大していることを明らかにした。2)細胞内Ca濃度受容体刺激直後に惹起されるCaストアからのCa放出においては、スナピンの有無で差はみられなかったが、それに引き続いて惹起される細胞外Caの細胞内流入については、スナピン共発現細胞では非常に高いレベルで維持されていることが観察された。3)このCa流入はSK&F感受性であり、これを阻害すると刺激後30秒以降のドーパミン分泌は抑制された。しかし、受容体刺激直後のドーパミン分泌量の細胞間の相違は、細胞外CaとSK&Fに非感受性であった。4.まとめalpha-1アドレナリン受容体とスナピンの相互作用により、PC12細胞において受容体の活性化に伴う細胞外Ca流入とドーパミン分泌が増大されることが明らかとなった。

到目前为止，已经表明，神经元中存在的称为Snapin的分子与神经递质的分泌有关，但其功能尚未完全理解。 In this study, we discovered that this snapin molecule interacts with the alpha-1 adrenergic receptor, modulates and modulates the reactions induced by receptor activation, and revealed the following points: 1. Immunoprecipitation and 2-yeast hybrid methods were used to reveal that snapine interacts with the C-terminal site of the alpha-1 adrenergic receptor. 2。我们使用荧光标记的Snapins和受体研究了亚细胞定位，并发现，尽管受体在细胞质中广泛分布在细胞膜和Snapin分子上，而在共表达时，这两者都位于树突质过程附近，并且由于受体刺激的局部性而增加，这种趋势会增加。 3。在Snapin共表达的细胞中共表达受体和Snapin的PC12细胞中受体激活诱导的反应差异1）多巴胺分泌的多巴胺分泌显示，多巴胺分泌的增加是仅受体细胞的两倍。 2）细胞内Ca浓度：在受体刺激后立即诱导的CA释放中，在存在或不存在Snapin的情况下，未观察到差异，但是可以观察到随后在Snapin共表达细胞中，随后的细胞外Ca的细胞内涌入被诱导的细胞外CA的涌入非常高。 3）这种CA涌入对SK＆F敏感，并抑制了30秒刺激后这种抑制多巴胺分泌的抑制作用。然而，受体刺激后多巴胺分泌量的细胞细胞差异对细胞外Ca和SK＆F不敏感。 4。总结已表明，α-1肾上腺素能受体和快照的相互作用增加了细胞外Ca的流入和与受体激活相关的PC12细胞中的多巴胺分泌。

项目成果

Alpha-1D adrenoceptors are involved in reserpine-induced supersensitivity of rat tail artery.

Alpha-1D 肾上腺素受体参与利血平诱导的大鼠尾动脉超敏反应。

• 发表时间: 2004
• 期刊: British Journal of Pharmacology 142・4
• 作者: Taki N.;et al.
• 通讯作者: et al.

pharmacological characterization of and cross talk of α1A and α1B-adrenoceptors coexpressed in human embryonic kidney 293 cells.

人胚肾 293 细胞中共表达的 α1A 和 α1B 肾上腺素受体的药理学特征和相互影响。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Pharmacol.Exp.Ther. 309
• 作者: Israilova M.;Tanaka T.;Suzuki F.;Muramatsu I.
• 通讯作者: Muramatsu I.

a1-アドレナリン受容体の変動とsupersensitivity

a1-肾上腺素能受体波动和超敏感性

• 发表时间: 2004
• 期刊: 応用薬理 66
• 作者: 村松郁延;田中高志;鈴木史子
• 通讯作者: 鈴木史子