神経軸索・樹状突起の伸長を制御するアクチン結合蛋白質の研究

控制神经轴突和树突伸长的肌动蛋白结合蛋白的研究

基本信息

批准号：
07680759
负责人：
石川良樹
金额：
--
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680759/
关键词：
アクチン結合タンパク質突起伸長成長円錐

项目摘要

脳の発生初期に大量に発現するアクチン結合蛋白質ドレブリンを精製し、その生化学的解析を行ったところ、この精製過程において、やはり発生初期に大量に発現する54kDaのアクチン結合蛋白質を検出した。この蛋白質はイミュノブロットの結果脳ファシンと判明した。さらに、ファシンの活性がドレブリンによって制御されていた。脳ファシンのアクチン線維結合能をアクチンとの共沈実験で調べたところファシンはアクチン線維にストイキオメトリー1:3、解離定数1x10^6Mで結合した。この結合はドレブリンによって阻害を受けた。さらに低速遠心法、電子顕微鏡法、及び蛍光標識アクチンを用いた蛍光顕微鏡法でアクチン束化活性を調べたところ、他のファシン同様脳ファシンもアクチン線維束化能を有していたが、この束化活性はドレブリンによって強く阻害を受けた。また蛍光抗体法でPC12細胞の成長円錐を調べたところ、ファシンがフィロポディア全体に、ドレブリンはフィロポディア基部にそれぞれ存在することがわかった。以上の結果から、ファシンがフィロポディアのアクチン構造に重要な役割を担っており、ドレブリンがそれを制御していると考えられる。

当我们纯化drebrin（一种在早期大脑发育过程中大量表达的肌动蛋白结合蛋白）并对其进行生化分析时，我们检测到了一种在早期大脑发育过程中也大量表达的54-kDa肌动蛋白结合蛋白。通过免疫印迹将该蛋白质鉴定为脑成束蛋白。此外，肌成束蛋白活性受drebrin调节。通过肌成束蛋白与肌动蛋白纤维的化学计量比为 1:3、解离常数为 1x10^6M 的共沉淀实验研究了脑肌成束蛋白与肌动蛋白纤维结合的能力。这种结合被drebrin抑制。此外，当我们使用低速离心、电子显微镜和荧光显微镜使用荧光标记的肌动蛋白研究肌动蛋白成束活性时，我们发现脑肌成束蛋白与其他肌成束蛋白一样，具有成束肌动蛋白纤维的能力，其激活活性被强烈抑制；德雷布林。此外，当我们使用免疫荧光检查PC12细胞的生长锥时，我们发现肌成束蛋白存在于整个丝状伪足中，而drebrin存在于丝状伪足的基部。这些结果表明，肌成束蛋白在丝状伪足的肌动蛋白结构中发挥着重要作用，而肌动蛋白则控制着它。