抗うつ薬の作用機序:イミプラミン結合部位の単離とその性質の解明

抗抑郁药的作用机制：丙咪嗪结合位点的分离及其性质的阐明

基本信息

批准号：
03454289
负责人：
柿本泰男
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454289/
关键词：
神経伝達機構一酸化窒素メチルアルギニン

项目摘要

我々がイミプラミン特異結合部位(5ーHT transporter)の精製を図っている間に、遺伝子間で保存性の高いことが予想されるGABA transporterに対するcDNAのクロ-ニングおよびその発現実験結果の発表が行なわれた。方法論的に、stringencyをさげたprobeを用いてのcDNAクロ-ニングがすぐさま世界で進行する、あるいはすでに進行中であることは明白であると我々は考えた。この予想は正しく、その半年後即ち我々も同様の方法で実験を試みている間に5ーHT transporterに対するcDNAクロ-ニングおよびその発現実験結果の発表がNatureあるいはScience誌に相次いで行なわれた。我々は計画を一部変更し、新たな神経伝達機構の解析に着手した。最近になって血管内皮由来血管弛緩因子が一酸化窒素であることがわかり、生体各所でのシグナル伝達因子としての一酸化窒素の役割が明らかになってきている。神経系でも2種の興奮性アミノ酸受容体がその伝達因子として一酸化窒素を用いていることが明らかにされ、また海馬錐体細胞の長期増強現象や小脳皮質での長期抑圧現象が一酸化窒素によって引き起こされることが昨年になって報告され、一酸化窒素のシグナル伝達因子としての機能がおおいに注目されている。さて、この一酸化窒素を生体内で合成する一酸化窒素合成酵素がin vitroでメチルアルギニンで強く阻害を受けることは多くの研究者によって明らかにされているが、遊離型メチルアルギニンが生体内に存在するか否かは未知であった。今回我々は、一酸化窒素合成酵素の活性制御に重要であると考えられる3種の遊離型メチルアルギニンをウシ脳から単離し同定した(J.Neurochem.in press)。またこれらの3種の遊離型メチルアルギニンを高感度に測定する方法を開発し、哺乳動物の各組織での分布を明らかにした(投稿中)。現在一酸化窒素による脳神経系の伝達機構の調節機構の解明に着手している。

在我们试图纯化丙咪嗪特异性结合位点（5-HT转运蛋白）的同时，我们宣布克隆了预计在基因中高度保守的GABA转运蛋白的cDNA，并公布了其表达实验结果。。从方法论上来说，我们相信使用低严格度探针进行 cDNA 克隆显然很快就会或已经在世界上进行。这个预测是正确的，六个月后，当我们还在用同样的方法进行实验时，5-HT转运蛋白的cDNA克隆和表达实验的结果陆续在《Nature》和《Science》杂志上发表。我们对计划做了一些改变，并开始分析一种新的神经传递机制。近年来，人们发现一氧化氮是一种血管内皮源性血管舒张因子，并且一氧化氮作为身体各部位信号转导因子的作用也逐渐明确。在神经系统中，已经发现两种类型的兴奋性氨基酸受体使用一氧化氮作为其递质，并且去年已经证明了海马锥体细胞的长期增强和小脑皮质的长期抑制。据报道，这是由一氧化氮引起的，一氧化氮作为信号转导因子的功能备受关注。许多研究人员揭示，体内合成一氧化氮的一氧化氮合酶在体外受到甲基精氨酸的强烈抑制，但游离的甲基精氨酸是否存在尚不清楚。在这里，我们从牛脑中分离并鉴定了三种类型的游离甲基精氨酸，它们被认为对于调节一氧化氮合酶的活性很重要（J.Neurochem.in press）。我们还开发了一种高度灵敏的方法来测量这三种类型的游离甲基精氨酸，并阐明它们在每种哺乳动物组织中的分布（目前正在提交）。目前，我们开始阐明一氧化氮调节大脑和神经系统传输机制的机制。