リン脂質により制御される標的分子の効率的探索法の開発と応用

磷脂调控靶分子高效搜索方法的开发及应用

基本信息

批准号：
18659073
负责人：
佐々木雄彦
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659073/
关键词：
低分子量Gタンパク質イノシトールリン脂質

项目摘要

イノシトールリン脂質はホスファチジルイノシトールのイノシトール環3,4,5位水酸基の可逆的なリン酸化の結果生じる多様な派生体の総称であり、生体膜に存在する。中でも、ホスファチジルイノシトール3,5-二リン酸(PI(3,5)P2)は、イノシトールリン脂質の中でも最も遅れて発見された分子種であり、未だその生理機能は明らかになっていない。本研究では、PI(3,5)P2により制御されることが期待されるRabGAP候補タンパク質に着目し、候補分子であるGRAMTBC1、GRAMTBC2、GRAMTBC3が実際にRabGAPとしての活性を持つか否かを明らかにすることにより、PI3,5)P2の生理機能の解明の端を開くことを目的として研究を進めた。上記の3分子に加えて、新たに1分子のRabGAP候補タンパク質を見出した。RNA干渉法でRabGAPタンパク質の発現を抑制することで引き起こされる細胞機能の変化を捉える実験を行った。対象とした4種類のRabGAP候補タンパク質うち一つの発現を低下させると、細胞内の小胞輸送に異常を示すことを見出した。これらの分子のRabGAP活性について、試験管レベルでの実験を行った。昨年度見出した、基質として挙げられる4種類のRab分子候補への活性が、実際に、PI(3,5)P2の共存により増強されるか否かを検討しているところである。本研究で、標的分子の効率的な探索についての一つの方法論を提示することができたが、今後実際に見出された分子の生理機能を明らかにする研究の継続が必要であると考えている。

肌醇磷脂是磷脂酰肌醇的肌醇环3、4、5位羟基可逆磷酸化而产生的各种衍生物的总称，存在于生物膜中。其中磷脂酰肌醇3,5-二磷酸（PI(3,5)P2）是肌醇磷脂中最新发现的分子种类，其生理功能尚不清楚。在本研究中，我们重点研究了预计受 PI(3,5)P2 调节的 RabGAP 候选蛋白，并阐明了候选分子 GRAMTBC1、GRAMTBC2 和 GRAMTBC3 是否确实具有 RabGAP 活性，从而继续我们的研究。研究旨在为阐明 PI3,5)P2 的生理功能打开大门。除了上述三个分子外，我们还发现了一种新的 RabGAP 候选蛋白分子。我们进行了一项实验，以捕获通过 RNA 干扰抑制 RabGAP 蛋白表达而引起的细胞功能变化。我们发现，降低四种 RabGAP 候选蛋白目标蛋白之一的表达会导致细胞内囊泡运输异常。我们在体外水平上对这些分子的 RabGAP 活性进行了实验。我们目前正在研究去年发现的四种作为底物的候选 Rab 分子的活性是否实际上因 PI(3,5)P2 的共存而增强。在这项研究中，我们能够提出一种有效寻找目标分子的方法，但我们认为有必要继续研究以阐明实际发现的分子的生理功能。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

DOCK2 is a Rac activator that regulates motility and polarity during neutrophil chemotaxis.

DOI：
10.1083/jcb.200602142
发表时间：
2006-08-28
期刊：
JOURNAL OF CELL BIOLOGY
影响因子：
7.8
作者：
Kunisaki, Yuya;Nishikimi, Akihiko;Tanaka, Yoshihiko;Takii, Ryosuke;Noda, Mayuko;Inayoshi, Ayumi;Watanabe, Ken-ichi;Sanematsu, Fumiyuki;Sasazuki, Takehiko;Sasaki, Takehiko;Fukui, Yoshinori
通讯作者：
Fukui, Yoshinori

PI(3)Kγ has an important context-dependent role in chemokinesis.

PI(3)Kγ 在趋化作用中具有重要的背景依赖性作用。