カベオリンの容量依存性カルシウム流入制御機構

Caveolin的容量依赖性钙内流控制机制

基本信息

批准号：
18659065
负责人：
村田幸久
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は"細胞小器官カベオラのCa^<2+>流入調節機構を明らかにすること"を目的とした。平成19年度は18年度で得た(1)Caveolin-1(Cav-1)遺伝子欠損(KO)マウス血管内皮細胞におけるCa^<2+>流入障害のメカニズム解析(2)Cav-1 KOマウスの心肺組織異常とその発症機構についての解析を行った。以下に詳細な実験結果を記載する。1 免疫沈降法により野生型マウス肺動脈内皮細胞においてCav-1が内皮細胞の容量依存性Ca^<2+>チャネルTRPC4とそれを活性化するIP3受容体に直接結合しており、刺激時に観察される両タンパク質の相互作用を物理的に仲介していること、さらにCav-1 KO動物の肺内皮細胞において、このCav-1を中心とするCa^<2+>流入調節機構が障害されていることを明らかにした。2 リコンビナント合成タンパク質を用いた検討によりCav-1におけるTRPC4結合部位(アミノ酸配列61-178)を特定した。3 上に述べたCa^<2+>流入調節機構の他に、Cav-1は血管弛緩因子であるNOの合成酵素eNOSの活性抑制作用をもつ。このためCav-1 KOマウスでは血中へのNO産生亢進が観察され、抹消血圧が低下していることを示した。4 抹消血圧とは逆にCav-1 KOマウスの肺動脈圧は亢進していた。その原因として肺組織内皮細胞がCav-1欠損により異常増殖し、肺動脈を圧迫していることを明らかにした。以上の結果について以下の2報の論文にまとめ公表した。

本研究的目的是“阐明Ca^2+流入小凹细胞器的调控机制”。 2007财年，我们获得了2018财年的结果 (1) Caveolin-1 (Cav-1) 基因缺陷 (KO) 小鼠血管内皮细胞 Ca^2+ 内流障碍的机制分析 (2) 我们分析心肺组织异常及其发病机制。详细的实验结果如下所述。 1 免疫沉淀显示，在野生型小鼠肺动脉内皮细胞中，Cav-1直接与内皮细胞体积依赖性Ca^2+通道TRPC4和激活它的IP3受体结合，并且在刺激时观察到。研究表明，这种以Cav-1为中心的Ca^2+流入调节机制在Cav-1 KO动物的肺内皮细胞中受损。 2 我们利用重组合成蛋白鉴定了 Cav-1 中的 TRPC4 结合位点（氨基酸序列 61-178）。 3 除了上述Ca ^ 2+ 流入调节机制之外，Cav-1还抑制eNOS的活性，eNOS是合成NO的酶，NO是一种血管舒张因子。因此，在 Cav-1 KO 小鼠中观察到血液中 NO 产生增加，表明外周血压下降。 4 与外周血压相反，Cav-1 KO 小鼠的肺动脉压力升高。我们发现，其原因是由于 Cav-1 缺陷导致肺组织内皮细胞异常增殖，压迫肺动脉。上述结果总结并发表在以下两篇论文中。