癌カベオラ異常がもたらす予後不良因子GPRC5Bを介した増悪メカニズムの解明

阐明由 GPRC5B 介导的恶化机制，这是由癌症小窝异常引起的不良预后因素

基本信息

批准号：
22K17193
负责人：
金森慶亮
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Kanagawa Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17193/
关键词：
頭頸部扁平上皮癌癌の糖代謝 GPRC5B 癌特異的カベオラ異常

项目摘要

以前我々は、糖尿病原因遺伝子であるGPRC5Bの発現量が、担がん患者の生命予後を左右すること、頭頸部扁平上皮癌細胞において糖飢餓状態での生存率に関与することを明らかにしている。GPRC5Bは細胞内外の情報伝達を行う重要な場所、カベオラに局在しているが、近年がんにおけるカベオラは機能異常を伴い、細胞膜での正常な情報伝達がなされていないことが明らかとなった。本研究では、なぜグルコース存在下で機能を発現するGPRC5Bが、がん細胞ではグルコースが存在せずとも機能するのかを解明するため、がん細胞におけるGPRC5Bの局在を解明することを優先項目としている。現在、GPRC5Bに対する既存の抗体は特異性が低く、信頼できるデータが得られていない。そこで、蛍光タンパク質GFPを付与した発現ベクターを作製し、細胞に遺伝子導入することで対応を試みた。GPRC5B発現ベクターに関しては、我々が以前の研究で既に作成済みであるので、着手可能であると考える。また当該年度においては、研究施設の老朽化、培養設備（インキュベータ）の経年劣化により一時的に細胞培養が不可能となった。現在、新規インキュベータの導入が完了しており、コンタミの有無確認後に細胞株を培養開始、安定化している状態である。

以前，我们已经表明，GPRC5b（致病基因）的表达水平影响了含有癌症的癌症患者的预后，并且参与了头部和颈部鳞状细胞癌细胞中葡萄糖饥饿的存活率。 GPRC5B位于Caveola中，Caveola是一个重要的地方，细胞内和外部信号传输是传播的，但是近年来，癌症中的小窝伴有功能异常，并且没有通过细胞膜传播正常信号。在这项研究中，我们将重点介绍为什么在葡萄糖存在下表达功能的GPRC5B即使没有葡萄糖也起作用，因此我们将优先考虑阐明癌细胞中GPRC5B的定位。当前，针对GPRC5B的现有抗体的特异性较低，并且不提供可靠的数据。因此，我们创建了一个包含荧光蛋白GFP的表达载体，并试图通过将基因转染到细胞中来处理它。关于GPRC5B表达向量，我们认为可以进行，就像我们在以前的研究中已经创建的那样。此外，在这个财政年度，由于研究设施的老化和培养设施（孵化器）的恶化，随着时间的流逝，培养细胞的暂时是不可能的。目前，已经完成了新的孵化器的引入，并且在检查污染后，细胞系已开始培养和稳定。