水晶体発育期のクリスタリン構造調節因子:SPring-8X線回折による統合的解析

镜片开发过程中的晶状体蛋白结构调节剂：使用 SPring-8 X 射线衍射进行综合分析

基本信息

批准号：
17659548
负责人：
毛利聡
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659548/
关键词：
水晶体クリスタリン X線回折ナトリウムカルシウム交換体

项目摘要

発達期ラット水晶体を用いて、主成分蛋白であるクリスタリンの分子構造がどのような調節を受けて透明性。高屈折性という特性を獲得するかを生化学的解析及びX線回折による構造評価により検討した。生後5日、10日、15日で水晶体蛋白濃度を測定したところ、それぞれ274±40、347±42、569±61[mg/lens vol.]であった。X線回折では、5日では散乱のみが観察され、10日より直径15[nm]程度のクリスタリン会合粒子によると考えられる回折像が出現し、15日では成ラットと同様なリング状の回折像が完成した。一般に蛋白は高濃度になると凝集しやすいが、発達期水晶体は成長に伴う蛋白濃度上昇とともに低温に対して凝集を免れる機構を獲得する。X線回折像により、この低温白内障惹起時の分子構造を検討したところ、クリスタリン会合粒子径は変化しておらず、より小角の位置で観察される粒子間相互作用の変化により低温白内障が起きることが示唆された。クリスタリン会合粒子の構造(直径約15nm、40量体)形成メカニズムの候補として各種クリスタリンの比率の変化に着日して、ラット水晶体に存在するαA、αB、β、γクリスタリン抗体を用いて水晶体連続切片を染色して検討した。水晶体は球面収差補正のため中心部の蛋白濃度がいが、クリスタリン抗体による染色では中心部が薄染となる傾向であった。これは中心部ほど会合粒子を形成して抗体接着を阻害することが原因と考えられ、抗体染色によるクリスタリン比率の違いを求めることは出来ず、現在ブロッティングによる解析を進めている。また、会合粒子の構造因子候補としてカルシウム代謝について調べるため、成長に伴うナトリウム-カルシウム交換体(NCX)の分布について検討した。その結果、会合粒子の主成分とされるαBクリスタリンとNCXの分布が非常に似ていることを発見した。

主要成分蛋白的分子结构是主要成分蛋白，使用发育大鼠晶体是透明的。是否通过生化分析和结构评估通过X射线衍射来检查高折射特性。当晶状体蛋白浓度在第5，第10和15位测量时，每个晶状体浓度均为274±40，347±42，569±61 [mg/镜头卷。在x射线中，仅在5天观察到散射，并且衍射图像被认为是由于cristarin遇到的粒子从10日起约15 [nm]，而在15日，相同的环 - 大鼠的形状折叠图像。通常，蛋白质很容易在高浓度下聚集，但是发育晶体是一种机制，随着蛋白质浓度的增加，蛋白质可以避免在低温下聚集。通过X射线折叠雕像检查了这种低温的白色分离障碍时的分子结构，晶体关联没有改变，并且由于在较小角度观察到的粒子相互作用的变化而发生了较低的白色隐匿性建议。持续到达各种晶体素的比率变化，作为Cristarin遇到颗粒的结构（约15 nm，40个定量）机制，并使用αA，αb，β和γ晶体抗体存在于大鼠晶体中碎片并检查了。由于球形像差校正，透镜具有蛋白质浓度，但中心倾向于用晶体蛋白抗体染色。这被认为是由于形成了遇见颗粒并抑制抗体粘合剂的原因，因此不可能寻求由于抗体染色引起的晶体比率差异，并且目前正在通过斑点进行分析。此外，为了研究钙代谢作为组装颗粒的结构因子的候选者，研究了伴有生长的钠钙交换（NCX）的分布。结果，发现αB晶体蛋白和NCX的分布非常相似。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

X-ray diffraction and biochemical analysis of α-Crystallin in developing rat lens

大鼠晶状体发育过程中α-晶状体蛋白的 X 射线衍射和生化分析

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
SPring-8利用報告書 2006A
影响因子：
0
作者：
Mohri S;Yagi N;Morizane Y;Nakayama M
通讯作者：
Nakayama M

Iris movement mediates vascular apoptosis during rat pupillary membrane regression.

DOI：
10.1152/ajpregu.00602.2005
发表时间：
2006-03
期刊：
American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology
影响因子：
0
作者：
Y. Morizane;S. Mohri;J. Kosaka;S. Toné;T. Kiyooka;T. Miyasaka;J. Shimizu;Y. Ogasawara;F. Shiraga;Y. Minatogawa;J. Sasaki;H. Ohtsuki;F. Kajiya
通讯作者：
Y. Morizane;S. Mohri;J. Kosaka;S. Toné;T. Kiyooka;T. Miyasaka;J. Shimizu;Y. Ogasawara;F. Shiraga;Y. Minatogawa;J. Sasaki;H. Ohtsuki;F. Kajiya