若年発症サルコイドーシスにおけるCARD15遺伝子変異とアポトーシス、免疫特権

年轻发病结节病中的 CARD15 基因突变、细胞凋亡和免疫特权

• 批准号: 17659337
• 负责人: 金澤 伸雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659337/
• 关键词: 遺伝子; 微生物; 免疫学

昨年に引き続き、若年発症サルコイドーシス(EOS)に認められる変異NOD2遺伝子を組み込んだヒト単球性細胞株THP-1の変異体を用い、解析をすすめた。当初、THP-1変異体をPMAで刺激しマクロファージ様に分化させた時のIL-8とIL-10の産生能が、293細胞に変異遺伝子を一過性に発現させた時のNF-kB活性化能の強さと相関するように思われたが、この時のNF-kB活性化を染色で明らかにすることはできなかった。実験によるばらつきが大きく、培養により導入NOD2遺伝子の発現が低下するためか、あるいは変異体の増殖能が悪いためか、シークエンスで確認すると、当初ほとんど変異遺伝子しか発現されていなかった変異体においても,正常NOD2の発現が強く見られるようになり、変異体による差が見えにくい状況であった。そこで改めてTHP-1への一過性遺伝子発現を試みたが、高発現を得ることはできなかった。一方、EOS患者組織を用い、IL-8とIL-10の染色を試みたが、特異的な染色を得ることはできなかった。TUNEL法では、類上皮細胞は染まらず、浸潤細胞が染まることから、マクロファージ/類上皮細胞に発現する変異NOD2からのシグナルにより、類上皮細胞ではアポトーシスが阻害され、逆にT細胞にアポトーシスが誘導されていることが予想された。今後は、通常のサルコイドーシスなど他の肉芽腫との比較も行い、EOSの発症機序を明らかにしていきたい。

去年之后，使用人类单核细胞系THP-1的突变体进行了分析，该突变体融合了在Young Nod-nod2基因（EOS）中发现的突变体NOD2基因。最初，当用PMA和巨噬细胞样分化刺激时，IL-8和IL-10产生Thp-1突变体的能力似乎与激活NF-KB的能力的强度相关，而当突变基因在293个细胞中暂时表达，但在此时间无法揭示NF-KB激活。也许由于实验的差异，引入的NOD2基因的表达会由于培养而降低，或者由于突变体的增殖不良而降低，当通过序列确认时，即使在最初几乎没有突变基因表达的突变体中，也很难看到突变体之间的差异。因此，我们试图将基因瞬时地表达为THP-1，但无法获得高表达。另一方面，我们尝试使用与EOS患者的组织对IL-8和IL-10染色，但无法获得特定的染色。在TUNEL方法中，上皮样细胞不染色并浸润细胞染色，并且可以预测，来自巨噬细胞/上皮细胞中表达的突变体NOD2信号会抑制上皮细胞中的凋亡，并进一步诱导T细胞中的细胞凋亡。将来，我们还将将其与其他肉芽肿（如正常结节病）进行比较，以阐明EOS发育的机制。

项目成果

若年発症サルコイドーシスとNOD2遺伝子変異

青少年发病的结节病和 NOD2 基因突变

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本小児皮膚科学会雑誌 25・1
• 作者: Naitoh M;Kubota H;Ikeda M;Tanaka T;Shirane H;Suzuki S;Nagata K.;Nobuo Kanazawa;金澤 伸雄;金澤 伸雄
• 通讯作者: 金澤 伸雄

最新皮膚科学体系 2006-2007 (分担執筆)

最新皮肤科系统 2006-2007（贡献者）

• 发表时间: 2006
• 作者: Naitoh M;Kubota H;Ikeda M;Tanaka T;Shirane H;Suzuki S;Nagata K.;Nobuo Kanazawa;金澤 伸雄;金澤 伸雄;Nobuo Kanazawa;Naotomo Kambe;Akihiro Fujisawa;金澤 伸雄;金澤 伸雄;玉置邦彦(総編集)
• 通讯作者: 玉置邦彦(総編集)

Blau症候群と若年発症サルコイドーシスの臨床像とCARD15/NOD2遺伝子異常

Blau 综合征和青少年发病的结节病的临床特征和 CARD15/NOD2 基因异常

• 发表时间: 2007
• 期刊: 日本臨床免疫学会会誌 30・2(印刷中)
• 作者: Naitoh M;Kubota H;Ikeda M;Tanaka T;Shirane H;Suzuki S;Nagata K.;Nobuo Kanazawa;金澤 伸雄
• 通讯作者: 金澤 伸雄

Early-onset sarcoidosis and CARD15 mutations with constitutive nuclear factor-kappa B activation : common genetic etiology with Blau syndrome.

早发性结节病和 CARD15 突变伴组成型核因子-κ B 激活：布劳综合征的常见遗传病因。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Blood 105・3
• 作者: Naitoh M;Kubota H;Ikeda M;Tanaka T;Shirane H;Suzuki S;Nagata K.;Nobuo Kanazawa;金澤 伸雄;金澤 伸雄;Nobuo Kanazawa
• 通讯作者: Nobuo Kanazawa

目で見るアレルギー性皮膚疾患

视觉过敏性皮肤病

• 发表时间: 2007
• 作者: Hirose S.;et al;森田 明理
• 通讯作者: 森田 明理