mRNA翻訳効率に対する転写過程での刷り込み現象

转录过程中的印记现象对 mRNA 翻译效率的影响

• 批准号: 17657040
• 负责人: 島 礼
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Miyagi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657040/
• 关键词: PP1; NIPP1; 転写; スプライシング; 翻訳; FHAドメイン; クロマチン免疫沈降法; 結合蛋白; PP2A; pp32; クロマチンリモデリング活性; mRNA

PP1の結合タンパクに関して以下の研究を行った。1.PP1/NIPP-1の遺伝子発現における機能(1)レポーター遺伝子(beta globin gene/BGG)と共にNIPP-1を細胞内に発現させ、クロマチン免疫沈降法で調べたところ、スプライシング前後のBGGmRNAと結合することが明らかとなった。(2)Lys-rich配列を欠損したNIPP-1は、共発現させたレポーター遺伝子のスプライシングを阻害する作用があることを見出した。(3)(2)の現象にはPP1結合ドメイン、FHAドメインが必須であった。したがって、NIPP-1がPP1と未同定のリン酸化タンパクとの結合を介して、スプライシング制御に働くこと。その機能にはLys-rich配列が重要であることが示唆された。(4)次にNIPP-1大量発現の翻訳への影響を調べたところ、BGG遺伝子の翻訳を抑えることが分かった。核蛋白であるNIPP-1は、細胞質イベントである翻訳を制御する機構をもつことが明らかとなった。以上、NIPP1は遺伝子のスプライシングから翻訳まで遺伝子の発現制御に関わる。2.アストロサイトにおける、PP1-ビメンチン結合の意味アストロサイトをイオノマイシンで処理すると、CaMKII依存性のビメンチンSer38とSer86のリン酸化が認められる。そのうちのSera38はすぐ脱リン酸化されるが、Ser86はリン酸化が維持されることを見出した。そのメカニズムを解析し、PP1がビメンチンのVal83-Asp84-Phe85部位と結合し、Ser38を効率よく脱リン酸化する一方で、空間的阻害により、ホスホSer86の脱リン酸化をブロックすることが明らかとなった。2.細胞分裂におけるPP1-オーロラA結合の意味PP1がオーロラAと結合して、スレオニン320を脱リン酸化することを見出した。

对PP1的结合蛋白进行了以下研究。 1. PP1/NIPP-1在基因表达中的功能 (1) 当NIPP-1与报告基因(β珠蛋白基因/BGG)一起在细胞中表达并通过染色质免疫沉淀检查时，发现它与BGG mRNA结合拼接之前和之后很明显。 (2)我们发现缺乏富含Lys序列的NIPP-1具有抑制共表达报告基因剪接的作用。 (3)PP1结合结构域和FHA结构域对于(2)的现象是必需的。因此，NIPP-1 通过 PP1 和未鉴定的磷酸化蛋白之间的结合来发挥剪接调节作用。有人认为富含赖氨酸的序列对其功能很重要。 (4)接下来，我们研究了NIPP-1的大规模表达对翻译的影响，发现它抑制了BGG基因的翻译。研究表明，核蛋白NIPP-1具有控制翻译的机制，这是一种细胞质事件。如上所述，NIPP1参与从基因剪接到翻译的基因表达调控。 2.星形胶质细胞中PP1-波形蛋白结合的意义当星形胶质细胞用离子霉素处理时，观察到波形蛋白Ser38和Ser86的CaMKII依赖性磷酸化。其中，Sera38立即去磷酸化，但发现Ser86仍保持磷酸化。通过分析其机制，发现PP1与vimentin的Val83-Asp84-Phe85位点结合，有效地使Ser38去磷酸化，同时在空间上抑制它，从而阻断磷酸化Ser86的去磷酸化。 2. PP1-Aurora A 结合在细胞分裂中的意义我们发现 PP1 与 Aurora A 结合并使苏氨酸 320 去磷酸化。

项目成果

生化学

生物化学

• 发表时间: 2007
• 作者: 前田礼男;穂積俊矢;谷口喜一郎;奥村高志;松野健治
• 通讯作者: 松野健治

Manzamenones Inhibits T-Cell Protein Tyrosine Phosphatase

Manzamenones 抑制 T 细胞蛋白酪氨酸磷酸酶

• 发表时间: 2006
• 期刊: Marine Drugs 4
• 作者: Masuda;N.;Ueshima R.;上島励;上島励;Kentaro Takagaki;Kentaro Takagaki;Yusuke Wakuda
• 通讯作者: Yusuke Wakuda

Phospho-regulation of human protein kinae Aurora-A : analysis using anti-phospho-Thr 288 monoclonal antibodies

人蛋白激酶 Aurora-A 的磷酸调节：使用抗磷酸-Thr 288 单克隆抗体进行分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: Oncogene 25
• 作者: Kentaro Takagaki;Yusuke Wakuda;Takashi Oguri;Sayaka Ohashi
• 通讯作者: Sayaka Ohashi

Phosphorylation of Ser-446 determines stability of MKP-7

• DOI: 10.1074/jbc.m500200200
• 发表时间: 2005-04-15
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Katagiri, C;Masuda, K;Shima, H
• 通讯作者: Shima, H

Characterization of novel low-molecular-mass dual specificity phosphatase-4 (LDP-4) expressed in brain

大脑中表达的新型低分子质量双特异性磷酸酶 4 (LDP-4) 的表征

• 发表时间: 2007
• 期刊: Molecular and Cellular Biochemistry 296
• 作者: Fukui;T.;Yanagihara;I.;Shiraki;K.;Hamada;D.;Hara;K.;Miyata;T.;Iida;T.;Fukusaki;E.;Imanaka;T.;Honda;T.;Kentaro Takagaki
• 通讯作者: Kentaro Takagaki