S6キナーゼを中心とする翻訳制御の細胞増殖,発がんにおける関与

以S6激酶为中心的翻译控制参与细胞增殖和癌变

基本信息

批准号：
12213004
负责人：
島礼
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213004/
关键词：
S6キナーゼ欠損マウスホスファターゼ細胞周期がん化翻訳 PP1 MAPK

项目摘要

1.新規のS6キナーゼ(S6キナーゼ2)欠損マウスの作製S6キナーゼ2ゲノムがターゲットされたES細胞を用いてキメラマウスを作製し、本遺伝子欠損マウスの作製に成功した。個体レベルで欠損マウスと野生型マウスの間でそのフェノタイプに大きな差はなかった。またTリンパ球、胎児由来繊維芽細胞の増殖速度は野生型とものと明らかな差は認められなかった。2.S6キナーゼを制御するホスファターゼの解析S6K1に結合し、直接その活性を制御している2A型ホスファターゼ(PP2A)の阻害蛋白cDNAのクローニングを行った。新規のものを含めて3種類の分子種を同定した。これら3種類のものは全く異なった組織分布をしていたが、いずれもG1/Sでその発現が上昇し、肝がん細胞で過剰発現をしていた。3.翻訳制御機構の解析mRNAのプロセッシングに働くNIPP-1蛋白質の様々な変異体を用いた実験により、この蛋白がAキナーゼや1型ホスファターゼ(PP1)を介して翻訳の調節に働いていることが示唆された。4.S6キナーゼシグナルとMAPKシグナルの関係MAPKのうちのJNKの脱リン酸化/不活性化に特異的に働くホスファターゼの単離に成功し、その解析をおこなった。このホスファターゼはホスホチロシン、ホスホセリン/スレオニンの両方を脱リン酸化する2重特異性ホスファターゼに属し、核-細胞質輸送に関係するシャトル蛋白であった。

1. 新型S6激酶（S6激酶2）缺陷型小鼠的创建我们使用以S6激酶2基因组为靶标的ES细胞创建了嵌合小鼠，并成功创建了该基因缺陷型小鼠。在个体水平上，缺陷小鼠和野生型小鼠的表型没有显着差异。此外，野生型和野生型细胞的T淋巴细胞和胎儿成纤维细胞的增殖率没有明显差异。 2.控制S6激酶的磷酸酶分析我们克隆了抑制2A型磷酸酶(PP2A)的蛋白质的cDNA，该蛋白质与S6K1结合并直接控制其活性。鉴定出三种类型的分子种类，包括一种新的分子种类。虽然这三种类型的组织分布完全不同，但它们在G1/S期表达增加，并且在肝癌细胞中过度表达。 3. 翻译控制机制的分析使用在 mRNA 加工中发挥作用的 NIPP-1 蛋白的各种突变体进行的实验表明，该蛋白通过 A 激酶和 1 型磷酸酶 (PP1) 来调节翻译。 4. S6激酶信号与MAPK信号之间的关系我们成功分离并分析了一种特异性作用于JNK（MAPK）去磷酸化/失活的磷酸酶。该磷酸酶属于双特异性磷酸酶，能够使磷酸酪氨酸和磷酸丝氨酸/苏氨酸去磷酸化，并且是参与核细胞质运输的穿梭蛋白。