時計遺伝子のRNA干渉法による昆虫光周測時機構への概日時計の関与の検討

利用时钟基因 RNA 干扰检查生物钟在昆虫光周期计时机制中的参与

基本信息

批准号：
17657028
负责人：
富岡憲治
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1.period2本鎖RNAを合成し、10μM・207nl投与したタンボコオロギ終令幼虫の活動リズムを、光電式アクトグラフを用いて長期間にわたり計測した。その結果投与した8個体のうち7個体で活動リズムが無周期となり、ピリオドグラムでもリズムが検出されなかった。この無周期状態は、3週間以上にわたって継続した。残りの1個体ではリズムが継続したが、その周期は正常個体に比べ、非常に長かった。2.period2本鎖RNA(10μM)207nlもしくは621nlをタンボコオロギメス成虫腹部に注射し、産下された卵から艀化した幼虫の光周反応を長日条件(明期16時間:暗期8時間)下で検討した。これらの幼虫発育には2通りが観察された。すなわち、約70%の個体はほぼ長日型の発育を示し、艀化後約70日までに羽化した。しかし、残りの30%はきわめてゆっくりと成長し、100日を越えて羽化が始まり、すべてが成虫になるまでには120日以上を要した。この幼虫発育パターンは恒暗条件下でのパターンに類似しており、2本鎖RNAにより光周測時機構の機能欠損が引き起こされた可能性が高い。3.これらの、period2本鎖RNA投与個体群の、羽化が早いグループと遅いグループの、羽化後の活動リズムを計測したところ、いずれのグループも活動リズムそのものは発現するが、正常個体に比べきわめて不明瞭であった。タンボコオロギの光周感受期は幼虫初期(1〜2令期)であるので、今後この時期の活動リズムを検討する必要があるが、この結果は、period RNA干渉により時計機能が低下し、その結果として光周測時機構の機能不全が生じたと解釈された。

1。合成周期双链RNA，并使用光电ACT图在很长一段时间内测量了10μM/207 NL的幼虫的活性节奏。结果，在8个施用个体中的7个中，有效的节奏是非循环的，即使在期刊图中也未检测到节奏。这种非环状状态持续了3周以上。其余个体的节奏持续了，但是周期比正常人的节奏更长。 2。在成年雌性雌性雌性的腹部注入时期双链RNA（10μM）207 NL或621 NL，在幼体雌性的腹部和幼虫树皮的光周期反应下在卵子上脱落的卵子在长期的长期条件下（16小时的光相：8小时的黑暗相）。观察到了两种类型的幼虫发育。也就是说，大约70％的人表现出了几乎长期的发展，并在吠叫后约70天出现。但是，剩余的30％的增长非常慢，100天后它开始出现，并且所有事物都花了120多天才能成为成年人。这种幼虫发育模式与在恒定的黑暗条件下相似，并且双链RNA可能导致光周期机制的功能缺陷。 3。当我们在该组中的出现后测量了这些组的早期和较慢的两组rNA治疗组的活性节奏时，两组的活性节奏本身均表达，但与正常个体相比，这是非常不清楚的。由于tambo胸板的光周期敏感性期是在幼虫的早期（1-2-2届期间），因此有必要调查将来此时的活动节奏，但该结果被解释为由于周期RNA的降低，因此RNA造成的时钟功能降低，导致光症的功能障碍，从而导致了时间循环的时间 - 循环时间循环。