マウス発生工学を用いた先天性水頭症モデル動物の開発

利用小鼠发育工程开发先天性脑积水动物模型

基本信息

批准号：
16659382
负责人：
加藤一郎
金额：
$ 2.11万
依托单位：
University of Toyama (2005-2006)Toyama Medical and Pharmaceutical University (2004)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

再現性の高い先天性水頭症のモデル動物はこれまでなく、水頭症の原因解明・新規治療法の開発には適切なモデル動物の開発が急務である。平成18年度の研究は以下のように進行した。1.前年度までに、脳グリア細胞系列で遺伝子発現を起こすGFAP (glial fibrillary acidic protein)遺伝子のプロモーターエンハンサー領域1.9kbpの下流に変異型TGFβ1(Cys223Ser ＆ Cys225Ser)をコードするcDNA、SV40 DNAをつないだ融合DNA (GFAPpro-TGFβ1-SV40)を持つトランスジェニックマウスを2系統(系統521、系統525)、作成した。2.上記のGFAPpro-TGFβ1-SV40トランスジェニックマウスの全脳RNAを用いてRT-PCR解析を行い、脳において変異型TGFβ1mRNAの発現が増加していることを確認した。3.抗TGFβ1抗体を用いてタンパクブロット解析を行い、2系統のトランスジェニックマウス脳において変異型TGFβ1蛋白質(12kDa)が増加していることを確認した。4.変異型TGFβ1の脳内発現レベルを上昇させるため、系統521、系統525についてhomoトランスジェニックマウスの作成を行った。heteroマウス同士の交配により、それぞれの系統につき約100匹の子孫を得た。合計約200匹を調べたが、典型的な先天性水頭症の発症は認めなかった。しかし系統521の中の1匹は生まれてすぐに頭蓋破裂で死亡した。本研究の結果、水頭症を起こす原因タンパクである変異型TGFβ1を脳内で安定的に発現するマウスをはじめて確立した。今後このトランスジェニックマウスを用いることにより、変異型TGFβ1発現による影響を胎生初期からの各発生段階の脳において分子形態学的に追跡することが可能になった。

从来没有很多模型的高度可再生性的先天性脑积水，并且迫切需要开发适当的模型动物来阐明脑积水的原因并开发新的治疗方法。 2006年的研究进行如下：1。到上一年，用融合DNA（GFAPPRO-TGFβ1-SV40）创建了两只转基因小鼠（铅521和525），这些小鼠与SV40 DNA相连，cDNA，编码突变的TGFβ1（Cys23Ser＆Cys＆Cys＆Cys＆cys25s），以及SV的cDNA，以及cys225s的cys225s和sv40。 GFAP（神经纤维纤维酸性蛋白）基因的增强剂区域，该基因在脑神经胶质细胞谱系中引起基因表达。 2。使用上述GFAPPRO-TGFβ1-SV40转基因小鼠的全脑RNA进行RT-PCR分析，并证实了突变体TGFβ1mRNA的表达在大脑中增加。 3。使用抗TGFβ1抗体进行蛋白质印迹分析，以确认在两个转基因小鼠大脑中增加了突变的TGFβ1蛋白（12KDA）。 4。为了提高突变体TGFβ1的脑表达水平，为菌株521和525制备了同型转基因小鼠。通过配合杂种小鼠，每种菌株获得了大约100个后代。总共检查了大约200只动物，但未发现典型的先天性脑积水。然而，521物种中的一种死于出生后不久的头骨破裂。这项研究的结果是，我们已经建立了稳定表达突变体TGFβ1的第一只小鼠，该突变体TGFβ1（一种脑积水的蛋白质原因）在大脑中。通过将来使用这些转基因小鼠，从胚胎生命的早期阶段，在每个发育阶段都可以跟踪突变体TGFβ1表达在大脑中的影响。

项目成果

期刊论文数量（61）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Effect of arachnoid plasty using fibrin glue membrane after clipping of ruptured aneurysm on the occurrence of complications and outcome in the elderly patients

DOI：
10.1007/s00701-006-0777-6
发表时间：
2006-06-01
期刊：
ACTA NEUROCHIRURGICA
影响因子：
2.4
作者：
Mino, Y.;Hirashima, Y.;Endo, S.
通讯作者：
Endo, S.

Surgical anatomy and efficient modification of procedures for selective extradural anterior clinoidectomy

选择性硬膜外前床突切除术的手术解剖学和手术的有效修改

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Minim. Invasive. Neurosurg. 47・6
影响因子：
0
作者：
Yoshimori A;et al.;Takahashi H;高橋英明;Genkai N;宇塚岳夫;高橋英明;藪原忠雄;高橋英明;加藤和夫;Uzuka T;Aoki H;加藤和夫;加藤和夫;Jin D.;Hori F.;Li F.;Shibata T.;Asahi T.;Li F.;Hirashima Y.;Nagai S.;Hamada H.;Hori E.;Hirashima Y.;Ichsan A.M.;Nishikata M.;Nagahori T.;Endo S.;Hamada H.;Kurosaki K.;Kurimoto M.;Kamiyama H.;Hayashi N.
通讯作者：
Hayashi N.

Neuronal responses to a delayed-reward go/nogo task in the monkey posterior insular cortex.

猴子后岛叶皮质中神经元对延迟奖励 go/nogo 任务的反应。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Neuroscience 143
影响因子：
0
作者：
Inoue;T;Nishimura;S;Havashi;N;Numagami;Y;Takazawa;H;Nishijima;M;Hasegawa S;Kurimoto M.;Nasser K.;Hayashi N.;Tsuboi Y.;Hayakawa Y.;Samii A.;Takeuchi M.;Inoue T.;Tsubota M.;Inoue T.;Jin D.;Hori F.;Hayashi N.;Li F.;Tada M.;Hibino Y.;Myint K. M.;Nomoto K.;Jin D.;Umemura K.;Sumiyoshi T.;Shibata T.;Noguchi K.;Mino Y.;Asahi T.
通讯作者：
Asahi T.

Transparent endoscopic sheath and rigid-rod endoscope used in endoscopic third ventriculostomy for hydrocephalus in the presence of deformed ventricular anatomy.

透明内窥镜鞘和硬杆内窥镜用于内镜下第三脑室造口术治疗存在脑室解剖变形的脑积水。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J. Neurosurg. 104
影响因子：
0
作者：
Inoue;T;Nishimura;S;Havashi;N;Numagami;Y;Takazawa;H;Nishijima;M;Hasegawa S;Kurimoto M.;Nasser K.;Hayashi N.;Tsuboi Y.;Hayakawa Y.;Samii A.;Takeuchi M.;Inoue T.;Tsubota M.;Inoue T.;Jin D.;Hori F.;Hayashi N.
通讯作者：
Hayashi N.

Therapeutic basis of vidarabine on adenovirus-induced haemorrhagic cystitis.

阿糖腺苷治疗腺病毒引起的出血性膀胱炎的治疗基础。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Antivir. Chem. Chemother. 15・5
影响因子：
0
作者：
Yoshimori A;et al.;Takahashi H;高橋英明;Genkai N;宇塚岳夫;高橋英明;藪原忠雄;高橋英明;加藤和夫;Uzuka T;Aoki H;加藤和夫;加藤和夫;Jin D.;Hori F.;Li F.;Shibata T.;Asahi T.;Li F.;Hirashima Y.;Nagai S.;Hamada H.;Hori E.;Hirashima Y.;Ichsan A.M.;Nishikata M.;Nagahori T.;Endo S.;Hamada H.;Kurosaki K.
通讯作者：
Kurosaki K.