培養細胞産生3次元細胞外マトリックスを用いた臓器再生因子の検索

使用培养细胞产生的 3D 细胞外基质寻找器官再生因子

基本信息

批准号：
15659317
负责人：
村岡正敏
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1.細胞の向きや形を規定する細胞外因子の同定とその性状の検討細胞が産生した細胞外マトリックス上に新たに細胞を播いた場合、その細胞の長軸方向が元の細胞の長軸方向と一致する現象を前年度見いだした。本年度はまず前年度その方向を規定する因子の候補として同定されたfibronectinについてRNAiを用いた発現抑制を行い、その方向規定への影響を解析した。細胞としては最も解析し易い筋芽細胞を用いた。この場合方向規定に明確な変化は見いだされなかった。但し、試みた4種類のターゲットサイトでのmRNA発現抑制効果は最高で50%程度であり、その程度の量で方向の規定は十分な可能性もあり更なる解析が必要である。2.細胞の向きや形の規定における細胞外因子の細胞内への情報伝達メカニズムの検討最近、細胞の向きの規定に中心体と微小管ネットワークが重要な役割をしていることが報告されてきている。例えば中心体と微小管繊維に結合するAPCの発現をショウジョウバエ中で抑制するとgermline stem cellの細胞分裂の方向性が異常になることが報告されている。そこで筋芽細胞の方向規定にこの系が関与するか検討するためRNAiによりAPCの発現を抑制した。方向の規定については明確な変化は今のところみとめられていないが、面白いことに癌抑制遺伝子のAPCの抑制が筋芽細胞においては増殖抑制を引き起こした。大腸癌で見られるN末のみのAPC蛋白を発現させても同様であった。このことから大腸細胞においてAPCが特殊な役割をしておりそのことが大腸癌発生に関与する可能性が考えられる。

1。确定在细胞产生的细胞外基质上播种新细胞时定义细胞及其特性的细胞外因子，我们发现了一种现象，其中细胞的长轴与原始细胞的长轴重合。今年，我们首先使用RNAi抑制纤连蛋白的表达，该表达被确定为确定上一年方向的候选因素，并分析了对方向调节的影响。使用的是最容易分析的细胞的成肌细胞。在这种情况下，在方向法规中未发现明显的变化。但是，在尝试的四个目标位点抑制mRNA表达的效果高达50％，并且可能足以满足该数量的方向性，并且需要进一步分析。 2。在细胞取向和形状调节中，对细胞外因子的信息传递机理的检查，据报道，中心体和微管网络在定义细胞方向方面起着重要作用。例如，据报道，抑制果蝇中与中心体和微管纤维结合的APC表达会导致细胞分裂在种系干细胞中的异常方向。因此，为了研究该系统是否参与定义成肌细胞方向，使用RNAi抑制了APC表达。目前尚未观察到有关方向调节的明显变化，但有趣的是，抑制肿瘤抑制基因APC会导致肌细胞的增殖抑制。即使表达在结肠癌中看到的仅N末端APC蛋白时，也是如此。这表明APC在结肠细胞中起着特殊的作用，这可能与结肠癌的发展有关。