BAC-TgMを用いたビタミンD3によるレニン遺伝子発現・血圧制御機構の解明

使用 BAC-TgM 阐明维生素 D3 的肾素基因表达和血压控制机制

基本信息

批准号：
15658105
负责人：
谷本啓司
金额：
$ 2.3万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究室では以前、内在のレニン遺伝子を欠損するマウスの作製を行った(レニン遺伝子欠損マウス)。このマウスにおいては、RA系は正常に機能せず重篤な低血圧状態となることがわかっている。次に私は昨年までの本研究成果として、レニン遺伝子の発現制御領域が正常(WT)あるいは変異型(MT)のBACDNAを用いて、トランスジェニック・マウスを作製した。同マウスの遺伝子発現解析の結果から、レニン遺伝子発現に必須の転写制御領域を見いだすことができた。そこで本年度は、レニン遺伝子欠損マウスとBACトランスジェニック・マウスを交配することにより、変異型のレニン遺伝子により、遺伝子の発現と血圧表現型をレスキューすることができるのかを検証することとした。この目的のために、内在レニン遺伝子が存在しない状態でBAC導入遺伝子を保持するレスキュー・マウスを交配により作製した。遺伝子型の解析はSouthern blot法により行なった。また、対照群としてレニン遺伝子ホモ欠損マウス(Ren-KO/Ren-KO)と、レニン遺伝子ヘテロ欠損マウス(Ren-KO/Ren-1c)とを用いた。これらのマウス(WT-BAC-Ren::Ren-KO/MT-BAC-Ren::Ren-KO)における血圧をTail-Cuff法により解析した結果、正常血圧の維持に必須のレニン遺伝子発現制御DNA領域を複数見いだすことができた。

此前，我们实验室创造了缺乏内源性肾素基因的小鼠（肾素基因缺陷小鼠）。众所周知，这些小鼠的 RA 系统无法正常工作，导致严重的低血压。接下来，根据我去年的研究结果，我使用具有正常 (WT) 或突变 (MT) 肾素基因表达控制区域的 BAC DNA 创造了转基因小鼠。从同一小鼠的基因表达分析结果中，我们能够发现肾素基因表达所必需的转录控制区域。因此，今年，我们决定将肾素基因缺陷小鼠与BAC转基因小鼠杂交，以验证突变的肾素基因是否可以挽救基因表达和血压表型。为此，通过繁殖产生了携带 BAC 转基因但缺乏内源性肾素基因的救援小鼠。使用Southern印迹法进行基因型分析。另外，以肾素基因纯合缺陷小鼠(Ren-KO/Ren-KO)和肾素基因杂合缺陷小鼠(Ren-KO/Ren-1c)作为对照组。使用 Tail-Cuff 方法对这些小鼠 (WT-BAC-Ren::Ren-KO/MT-BAC-Ren::Ren-KO) 的血压进行分析，结果显示 DNA 调节肾素基因表达，这对于维持正常血压至关重要血压，被检测到。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Identification of cis-regulatory sequences in the human angiotensinogen gene using transgene coplacement and site-specific recombination

使用转基因共置和位点特异性重组鉴定人血管紧张素原基因中的顺式调节序列

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Molecular and Cellular Biology 25(8)
影响因子：
0
作者：
Shimizu;T.;Oishi;T.;Omori;A.;Sugiura;A.;Hirota;K.;Aoyama;H.;Saito;T.;Sugaya;T.;Kon;Y.;Engel;J.D.;Fukamizu;A.;Tanimoto;K.
通讯作者：
K.